植物染色体的制片与观察.docx

精选文档 植物染色体的制片与观察以及核型分析 组员：郑石悦 陈雨佳 吴俊强 植物染色体的制片与观察 一.实验目的： 了解预处理，固定，解离，染色，烤片，及压片的步骤和作用。 掌握植物有丝分裂染色体常规制片技术。 观察有丝分裂过程中染色体的形态特征以及动态变化。 二．实验原理： 植物根尖分生组织的细胞有丝分裂比较旺盛，每天都有分裂高峰时期。 不同植物分裂高峰时期是不同的。 大蒜和洋葱细胞的有丝分裂高峰时期通常在上午九点到 十一点。 把分裂时期的根尖用固定液固定，再经染色后压片，在显微镜下进行观察，就能看到处于 有丝分裂各时期的细胞和染色体。 预处理可以使染色体缩短变粗，易于计数。同时抑制细胞分裂过程中纺锤丝的形成，使更 多细胞停留在分裂中期。 这时，染色体分散在整个细胞质中， 有利于染色体的形态数目观察。 三． 实验材料： 洋葱 实验用具： 显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，镊子 ，解剖针，恒温培养箱，恒温水浴箱，棉签，刀 精选文档 片 试剂： 95% 乙醇，冰醋酸，盐酸，醋酸洋红染色液，秋水仙素， 2 甲苯 四.实验步骤： 材料的培养：洋葱置于盛有湿沙的托盘中， 20~25 度培养至根长 1~2 厘米时取材。取材 时使用解剖针及镊子。 预处理： （1）化学药物处理： 0.05%~0.2% 秋水仙素水溶液在室温条件下处理 2~4 个小时 （注意时 间不能过长，过长染色体会变得很短，不利于研究） （2） 冷冻处理：将根尖置于盛有冰雪混合物的烧杯中，保存于 1~4 度的冰箱 20~24 个小 时（化学药物处理对染色体有破坏。冷冻处理无破坏，对禾本科植物效果良好） 固定 :将材料再用蒸馏水冲洗两次， 转入卡诺氏固定液 （乙醇和冰醋酸以三比一混合） 中固 定 24 个小时（注意取材和固定时要在有丝分裂高峰期） 。 解离：将根尖用蒸馏水冲洗后放入已经在 60 度恒温水浴箱中预热的 1mol 每升的盐酸中， 60 度水浴约十分钟，当根尖的伸长区变透明而分生区呈米黄色或乳白色时即可取出，用蒸 馏水冲洗后备用。 染色及压片：取出根尖，去掉伸长区，留 1~2mm 的分生组织区滴一滴醋酸洋红染色液， 染色 2~3 分钟，然后盖上盖玻片，在酒精火焰上方加热至手背触摸盖玻片时感到微烫（酒 精灯加热的作用是 1. 软化细胞，易于压片 2. 使细胞质颜色变浅，使染色体颜色反差加大， 利于观察 ）。在盖玻片上盖上吸水纸， 用左手大拇指和二拇指固定盖玻片两端， 右手拿棉签 垂直敲击盖玻片几下，使材料分散。然后用右手大拇指用以按压盖玻片，将材料压成一层。 观察：将压好的片现在低倍镜下观察，找到处于分裂时期的细胞后，再转换到高倍镜下观 精选文档 察染色体的形态特征， 观察不同分裂时期的细胞即可了解染色体在整个细胞分裂时期的动态 变化特点。 核型分析实验