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石斛多糖的提取分离技术 石斛简介 石斛多糖的提取方法 Chapter3 结果与分析 Chapter2 Chapter1 ? Chapter1: 石斛简介 石斛属兰科石斛属多年生草本植物,全世界约 有 1 400 种,其中铁皮石斛是我国常见的石斛品种 之一. 铁皮石斛具有抗肿瘤、抗氧化、降血糖和降 血脂等多种功效,现代药理学研究表明,石斛多糖 是石斛中的主要功能成分。 ? Chapter2: 石斛多糖的提取方法 ? 植物中多糖的提取方法 : ? 溶剂提取法、酸提法、碱提法、酶解法、 超滤法、超声波强化法、微波法、 超高压提取法等。 ? 1 超高压法提取石斛多糖 ? 1.1 UHP 法提取 DP 原理 : 在升压时,通过渗透作用,溶剂进入细胞内部,在此过程中 细胞的结构在高压下受到不同程度的破坏。保压时,细胞内容 物与进入细胞内部的溶剂接触,有效成分溶于这些溶剂中。在 泄压过程中,细胞外部的压力减小为零,细胞内部的压力仍然 保持平衡时的压力,即此时压力差与施加压力时方向相反。由 于施加的是高压,因此这种反方向的压力差仍然是很大的,因 此细胞壁变形而破坏,溶解了有效成分的溶剂泄出。 ? 1.2UHP 法提取 DP 过程: 称取 10 g 石斛粉,加水混合后装 入高压聚乙烯塑料袋,真空包装 放入超高压装置中进 行高压处理 处理后过滤得提取液,滤渣 继续提取 2 次,合并提取液 3500 r /min 离心 10 min 上清液真空浓缩,加无水 乙醇,调节到乙醇浓度 70% , 静置 4 h ,收集沉淀。 测定多糖含量 计算多糖得率 多糖得率 = 提取得到的多糖质量 / 原料质量× 100% 多糖含量:苯酚硫酸法 DP 得率平均 为 19.27% 。 原料粉碎度 60 目,固液 比 1:20 ,提 取时间 6min , UHP 压力 300MPa 。 最佳提 取条件 ? 1.3 结果与分析 ? 2 石斛多糖超声提取方法 ? 2.1 超声法提取原理 ? 超声提取法是应用超声波强化提取植物多糖的方法 , 是一种物理 破碎过程。当超声波振动时能产生并传递强大的能量 , 引起媒质 以大的速度加速进入振动状态。使媒质结构发生变化 , 促使有效 成分进入溶剂中 , 同时 , 超声波在液体中还会产生空化作用。空 化泡在瞬间涨大并破裂 , 破裂时吸收的声场能量在极短的时间和 极小的空间内释放出来 , 形成高温和高压的环境 , 同时伴随有强 大的冲击波和微声波 , 从而破坏细胞壁结构 , 使其在瞬间破裂 , 植物细胞内的有效成份得以释放 , 直接进入溶剂并充分混合 , 从 而提高提取率。 ? 2.2 超声法提取石斛多糖工艺流程 : 经粉碎好的石斛粉 100g ,加 水后置不锈钢圆筒中 进行超声波水浴加热提取 ( 超声功率恒定为 300W ) 离心 5 000 r/min 去渣 得上清液 上清液浓缩后,加无水乙 醇调节到乙醇浓度为 95% , 静置 8h 得到的沉淀物,加适量蒸馏 水溶解 15 000 r /min 离心 10 min 沉淀 测定多糖含量 计算多糖得率 多糖得率 = 提取得到的多糖质量 / 原料质量× 100% 多糖含量:苯酚硫酸法 最佳提取条件:固 液比 1:30 , 提取 温度50℃, 提取 时间 1.5h ,超声波 提取频率 45KHz 。 平均提取得率为 15.3% ,优于常规 条件下水提多糖得 率 10.2% 。 结果分析 ? 3 热水法回流提取多糖 ? 3.1 提取原理: ? 溶剂提取法遵循相似相溶的原则,在所有溶剂中 , 水是典型的 强极性溶剂 , 对植物组织的穿透力强 , 提取效率高 , 在生产上 使用安全。一般植物多糖提取多数采用热水浸提法 , 该法所得 多糖提取液可直接或离心除去不溶物 ; 利用多糖不溶于高浓度 乙醇的性质 , 用高浓度乙醇沉淀提纯多糖。 ? 3.2 热水法回流提取多糖工艺流程 取石斛 10 g ,加 200 ml 水, 混合后在60 ℃下浸提 2 h 过滤得提取液,滤渣继 续提取 2 次,每次 1 h ,合并提取液 3500 r /min 离心 10 min , 得上清液 真空浓缩,加无水乙醇, 调节到乙醇浓度 70% ,静置 4 h ,收集沉淀 测定多糖含量,计算多糖得率 多糖得率 = 提取得到的多糖质量 / 原料质量× 100% 多糖含量:苯酚硫酸法
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