大鼠脑缺血模型制作.pdfVIP

脑缺血模型分类及制备 1. 全脑缺血模型 一般采用四血管闭塞法制作大鼠全脑缺血模型。 也有人通过结扎双侧颈动脉闭塞配合低氧或 放血降压使全脑缺血。 但是全脑缺血模型与人类通常的脑梗死 （多为单一血管闭塞） 情形不 一致 , 且不能进行健患侧自身对照所以全脑缺血的动物模型在脑缺血研究中用的较少 。 2. 局灶性脑缺血模型 2.1. 线栓法： 大脑中动脉阻塞 (middle cerebral artery occlusion ，MCAO)是目前最常用 的局灶性脑缺血模型 ,MCAO模型先阻断颈外动脉 （ECA）及其分支， 且阻断翼腭动脉 （PPA）， 以切断颅外来源的侧副循环血流。 从 ECA插入尼龙线， 经颈内动脉 （ICA ）到大脑前动脉 （ACA）， 机械性阻断大脑中动脉（ MCA）发出处的血供来建立大脑中动脉缺血模型。此模型可在无麻 醉状态下拔出尼龙线，恢复血流，实现再灌注。 线栓法具有不开颅、效果肯定、可准确控 制缺血及再灌注时间的优点， 用于研究神经元对缺血的敏感性、 耐受性， 药物疗效观察以及 再灌注损害和治疗时间窗较为理想， 同时也具有对全身影响小、 动物存活时间长的特点， 适 于慢性脑损伤的研究。控制好易变因素，可避免实验结果的不稳定性。 1.0 实验动物 1.2 SPF 级 SD大鼠，健康，雄性，体重为 250g-300g 1.3. 建模方法 1.4 颈部正中切口， 暴露右侧颈总动脉， 颈内动脉和颈外动脉。 使用 6-0 丝线在距离颈总动 脉分叉 4mm处结扎颈外动脉远心端， 在颈外动脉穿入另一根 6-0 丝线， 在靠近颈总动脉分叉 处打一个活结。 3. 使用动脉夹夹闭颈总动脉。 在距离颈总动脉分叉处 3mm处的颈外动脉上剪一个小口， 将一 根头端处理过的 0.33mm直径的尼龙线从小口中插入，进入颈内动脉，并向内插入大脑中动 脉，尼龙线的插入深度距离颈总动脉分叉处约 16±1mm。 4. 缺血后 90min 拔掉线栓， 用 6-0 丝线结扎外动脉近心端， 用 3-0 丝线缝合颈部伤口， 活力 碘消毒伤口，将大鼠放在加热垫上，待清醒后放入恒温抚养箱饲养。 2.2 化学刺激诱导血栓性阻断法 首先开颅暴露嗅束和大脑下静脉之间的大脑中动脉，并置一小片塑料薄膜保护血管周围组 织，将浸有 50% FeCl3 溶液 10ul 的定量滤纸敷于暴露的大脑中动脉上 30min 。 术后 24h 大 脑中动脉内即可形成混合性血栓。其优点既能反 应抗栓药又能反应溶栓药的药效，缺点是 必须开颅，创伤较大。 2.3 微栓子阻断法 微栓子栓塞法是将微栓子分段注入颈内动脉， 这样不仅颅内形成栓塞， 而且颅外也栓塞， 有 一定的缺点。近来有研究者改良了微栓子阻断法，将导管插至大脑中动脉起 始部的血管腔 内，通过导管把微栓子注入颅内段 , 对栓子进入大脑中动脉供血区所致的损伤进行组织病理 学分析等，这种模型成功率高些，但是也存在一定缺点。 2.4 开颅阻断法 利用显微外科技术， 开颅暴露大脑中动脉， 电凝阻断大脑中动脉的不同部位， 发现在基底核 和皮质区这些部位可形成相对比较恒定的梗死灶。 这种模型在一定程度上接近人类脑缺血的 情况，但在实验过程中可能会一定程度上损伤相邻的部分脑组织。 2.5 光化学诱导法 通过静脉途径注射光化学诱导剂玫瑰红 B，然后用特定波