蛋白质的研究方法与原理精品课件.pptVIP

2. 质谱法 质谱技术－－基于串联质谱技术的氨基酸测序方法是根据质谱技术测定多肽分子质量的极高准确性这一特点而设计的 。 ①先测定某一肽段（如：A-B- C-D-E-F-G-- ）以及从C-末端或N-末端去除一个残基的同一肽段（如：B-C-D-E-F-G-）各自的分子质量，二者之差值即为末端残基（A）的分子质量。 ②然后与20种标准氨基酸的分子量进行比较就可以确定末端氨基酸的本质了。 测定时： 实际操作时： 从质谱上得到的是一系列的多肽片段，每对大小相近的片段之间仅仅相差一个氨基酸残基。 根据这一分子量差值的大小，较大肽段的末端残基即可准确判断。换句话说，从获得的一系列依次相差一个残基的肽段的分子质量中我们很快就可以确定最初样品多肽的末端序列（从N一末端或C一末端开始）。 二、蛋白质空间结构分析 （一）X射线衍射晶体分析法 （二）核磁共振法 （三）圆二色谱法 （四）傅里叶变换红外光谱法 （五）生物信息学预测蛋白质空间结构 （一）X射线衍射晶体分析法 X射线本质 X射线是一种短波长(0.005～10nm)、高能量(2.5×105 ～1.2×102eV)的电磁波。它是原子内层电子在高速运动电子流冲击下，产生跃迁而发射的电磁辐射。 X-射线晶体结构分析基本原理 X射线衍射分析所依赖的基本原理是X射线衍射现象 X射线衍射现象利用X射线的