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交叉配血标准操作规程
(抗人球蛋白法)
一、目的:
为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程。
二、适用范围
适用于输血科进行交叉配血试验。
三、职责
输血科技术人员负责交叉配血试验。
四、试剂及材料
(一)试剂:抗人球蛋白检测卡(西班牙 Diagnostic Grifols,S.A公司生产)
(二)设备:戴安娜专用离心机(型号:DG SPIN)、戴安娜专用孵育器(型号:DG THERM)、微量移液器(5-50ul)、普通离心机、玻璃试管、生理盐水等
五、标本要求:
(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为EDTA.K2)静脉血2-3ml, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存:血液样本必须密封,2-8℃保存7天。
(三)用于交叉配血必须是2-8℃保存3天以内的标本。
六、操作步骤:
(一)交叉配血前,先复检患者和献血者ABO和Rh血型。
(二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机离心9分钟左右,取出待用。
(三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧,撕掉配血卡上的封条。
(四)取试管两支,分别配制患者和献血者红细胞悬液(浓度为1%)待用。
(五)交叉配血:
主侧:用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或血浆25ul ;
次侧:用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆25ul。
(六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟,移出放入离心机9分钟,取出观察结果。
七、结果观察:
(一)主侧和次侧均不凝集,细胞沉于反应卡的底部,配血相合,可以输血
(二)主侧或次侧出现凝集,细胞悬挂于卡的中间或上部,配血不相合,不可以输血
(三)若输注血液为红细胞,则只需主侧配血相合。
微柱卡式法凝集强度描述
凝集强度
描述
阴性
100%(全部)的红血球沉在微管的底部
+/-
100%(全部)的红血球沉在微管的下端1/3之内
1+
80%(大部分)的红血球沉在微管的下端2/3之内
2+
80%(大部分)的红血球沉在微管的上端2/3之内
3+
80%(大部分)的红血球沉在微管的上端1/3之内
4+
凝集的细胞处于微管的顶部
DP(双群)
红血球同时位于微管上部和微管底部
H(溶血)
微管中液体出现透明红色
盐水介质交叉配血标准操作规程
检验项目名称:盐水介质交叉配血
检验原理:交叉配血试验系指检查受血者、献血者的看远及抗体成分是否相容,以及是否含不规则抗体等,以保证安全输血。
试剂:0.9%生理盐水
操作步骤:
抽取受血者静脉血3-5ml待凝固后分离血清,并制备2%盐水悬液。
将供血者血样以同样方法分离血清,并配制2%红细胞悬液
取洁净小试管(10×60mm)2支,一支标明受血者血清(PS)+供血者细胞(DC)或‘主侧’;另一支标明供血者血清(DS)+受血者细胞(PC)或‘次测’。
按标记‘主侧’管加受血者血清1滴和供血者红细胞悬液1滴。‘次测’管加供血者血清1滴和受血者红细胞悬液1滴。混匀以1000r/min离心1min,轻轻侧动试管,观察结果。冬季室温较低,应将试管保温,以防冷凝集反应影响结果判断。
ABO同型配血,‘主侧’和‘次测’均无溶血及凝集表示无输血禁忌,可以输血。
交叉配血操作规程(凝聚胺法)
一.目的
规范交叉配血试验操作;保证临床用血的安全性和有效性。
二.适用范围
适用于临床配血标本。
三.职责
血库技术人员负责交叉配血试验
四.所需材料和设备
材料:凝聚胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本。
设备:普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜
五.操作步骤
1.凝聚胺法
(1)以生理盐水配制供、受者3%~5%红细胞悬液。
(2) 取试管3支,标记主、侧和自身对照
主侧加受血者血浆(血清)2滴,献血者3%~5%的红细胞悬液1滴;次侧加献血者血浆(血清)2滴,受血者3%~5%的红细胞悬液1滴;自身对照管加患者血浆(血清)2滴和患者3%~5%的红细胞悬液1滴混匀。
(3)以1000r/分钟离心1分钟,观察盐水介质实验结果。
(4)每管各加低离子介质(LIM)溶液0.7ml,混合均匀,室温孵育1min。
(5)每管各加2滴凝聚胺溶液,混匀后静置15s。
(6)1000r/分钟离心1分钟,倾去上清液,不要沥干。
(7)轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,必须重复步骤(3)-(6)
(8)加入2滴重悬液,并轻轻混合,观察结果。
(9)结果判定
如凝聚散开,则为凝聚胺引起的非特异性凝集,判为阴性结果,配血相合;如凝聚不散开,则为抗原抗体结合的特异性反应,判为阳性结果,配血不相合,如肉眼观察凝集强度弱,可进一步在显微镜下观察有无凝集。结果判定要求在1min内完成
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