小鼠骨髓细胞染色体标本的制备.pdfVIP

小鼠骨髓细胞染色体标本的制备 【目的要求】 1.掌握小鼠细胞染色体标本制备方法。 2.计数并观察小鼠骨髓细胞分裂中期染色体的数目及特点 【基本原理】 在骨髓细胞中，有丝分裂旺盛，因此不需要体外培养就可以直接得到中期细胞。骨髓细胞具有高度的分裂活 性，经秋水仙素或秋水酰胺处理后，使分裂细胞阻断在有丝分裂中期，再经低渗处理、固定、滴片、染色等 步骤，可制作较好的骨髓细胞的染色体标本。 【实验用品】 1 ．器材：解剖刀、剪刀、镊子、注射器、离心机、离心管、恒温水浴箱、冰冷载玻片、酒精灯、大培养 皿、显微镜、纱布 ,标签纸，记号笔等； 2 ．试剂 ? %秋水仙素溶液、 Carnoy ’s固定液 （甲醇：冰醋酸＝ 3 ： 1 ）、 mol / L KCI 溶液、 Giemsa 染液等。 ?? 3 ．材料： 65-90 天健康小鼠 （生技 09 级 72 人，新华 09 生物技术 36 人，生科 08 级 75 人，生技 08 级 70 人， 共 253 人，需购小鼠 110 只） 【方法与步骤】 1 ．前处理 ?? 取材前 3 ～4 h ，向腹腔内注射秋水仙素。注射浓度随动物种类不同而异，一般每克体重注射 2 ～6 μg，注射总量不宜超过 2 ml （例如一只体重