实验培养基的配制和灭菌.pptVIP

1 、为什么在操作的第一步以及划线之前都要灼烧接 种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环？ 第一步灼烧接种环 是 为了避免接种环上可能存在的 微生物污染培养物 ； 每次划线前灼烧接种环 是 为了杀死上次划线结束后， 接种环上残留的菌种 ， 使下一次划线时，接种环上的 菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数 的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得 到菌落。 划线结束后 仍然要灼烧接种环， 能及时杀死接种环 上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 平板划线法的讨论 : 2. 在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行 划线？ 以免接种环温度太高，杀死菌种。 3. 在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是 从上一次划线的末端开始划线？ 划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少， 每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随 着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个 细菌繁殖而来的菌落。 平板划线法获取的微生物经恒温培养后的生长情况 平板划线法获取的微生物经恒温培养后的生长情况 2. 稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度 稀释 ，然后 将不同稀释度 的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养 。 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将 分散成单个细胞，从而能 在培养基表面形成单个的菌落 。 稀释涂布平板法操作过程分两个步骤，即 系列稀释 操作 和 涂布平板操作 。 到目前为止 几十项诺贝尔生理学和医学奖、化学奖 都与 微生物学 有关 微生物基础知识 微生物的分类 原核生物 原生生物 真菌 病毒 特点： 结构都相当简单 , 个体多数十分微小。通常 要用光学显微镜或电子显微镜才能看清楚。 专题 2 : 微生物的培养与应用 一、培养基作用、种类 二、无菌技术 三、制备牛肉膏蛋白胨培养基 四、纯化大肠杆菌 主要内容 一、培养基 人们按照微生物对 营养物质 的不同需求，配 置出供其 生长繁殖 的营养基质称培养基。 1. 培养基定义： 2. 培养基的营养构成 (1) 基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐 ①碳源 无机碳源： 有机碳源： CO 2 、 CO 3 2 - 、 HCO 3 - 牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ②氮源 无机氮源： 有机氮源： NH 4 ＋ 、 NO 3 - 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注：含 C 、 H 、 O 、 N 的 有机物 是 异养 型微生物的 碳源、氮源 ? 牛肉膏 又称牛肉浸膏，是采用新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、 过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。 有牛肉自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黄色。 富含：糖类、碳源、维生素、磷酸盐等 ? 蛋白胨 蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥 而成的外观呈淡黄色的粉剂，具有肉香的特殊气息。 蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。在 胃内蛋白质的初步消化产物之一就是蛋白胨。蛋白胨 富含有机氮化合物，也含有一些维生素和糖类。 富含：氮源、一些维生素 (2) 特殊营养： （牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有） (3)pH 、氧气的需求 维生素 、 碱基等 例如 : 培养 乳酸杆菌 时需要在培养基中添加 维生素 ； 培养 霉菌 时需将 PH 调至酸性 ； 培养 细菌 时需将 PH 调至中性或微碱性 ； 培养 厌氧型微生物 时则需要提供 无氧 的条件。 营养要素 含义 作用 主要来源 碳源 凡能提供所 需碳元素的 物质 构成生物体细 胞的物质和一 些代谢产物； 有些是异养生 物的能源物质 无机化合物 ： CO 2 、 NaHCO 3 ； 有机化合物 ：糖 类、脂肪酸、花 生饼粉、石油等 氮源 凡能提供所 需氮元素的 物质 合成蛋白质、 核酸以及含氮 的代谢产物 无机化合物 ： N 2 、 NH 3 、铵盐、 硝酸盐； 有机化合物 ：尿 素、牛肉膏、蛋 白胨等 培养基的成分及功能 特殊营 养物质 生长必不可少的 微量 有机物 酶和核酸的组 成成分 维生素、氨基 酸、碱基等 水 在生物体内含量 很高，在低等生 物体内含量更高 不仅是优良的 溶剂而且可维 持生物大分子 结构的稳定 无机盐 为微生物提供除 碳、氮以外的各 种重要元素，包 括大量元素和微 量元素 细胞内的组成 成分，生理调