食品中合成着色剂的测定方法.docxVIP

食品中合成着色剂的测定方法 食品中合成着色剂主要是以人工方法进行化学合成的有机色素类，按其化学结构不同可 分为偶氮类色素和非偶氮类色素，偶氮类色素按溶解性不同又可分为油溶性和水溶性两类。 合成类色素中还包括色淀。 食品中合成着色剂的种类很多，国际上允许使用的有 30余种，我国允许使用的主要有竟 菜红、胭脂红、赤薛红、新红、玫瑰红、柠檬黄、日落黄、亮蓝、靛蓝、牢固绿等。 6.1高效液相色谱法 原理 食品中的合成着色剂经聚酰胺吸附法或液一液分配法提取后，制成水溶液，注入高效液 相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。 利用高效液相色谱法测定食品中合成着色剂的最小检出量为： 新红5ng、柠檬黄4ng、竟 菜红6ng、胭脂红8ng、日落黄7ng、赤薛红18ng、亮蓝26ng。当进样量为0.025g样品 时，最低检出浓度分别为 0.2、0.16、0.24、0.32、0.28、0.72、1.04mg /kg。 仪器和试剂 仪器 高效液相色谱仪，带紫外检测器。 试剂 ⑴正己烷。分析纯。 ⑵盐酸。分析纯。 ⑶乙酸。 ⑷甲醇：经滤膜(0.45期)过滤。 ⑸聚酰胺粉(尼龙6):过200目筛。 ⑹乙酸铉溶液(0.02mol / L):称取1.54g乙酸铉，加水至1 000mL ,溶解，经滤膜(0.45 ) 过滤。 ⑺氨水：量取氨水 2mL，加水至100mL ,混匀。 ⑻甲醇一甲酸(6+4)溶液：量取甲醇 60mL，甲酸40mL ,混匀。 ⑼柠檬酸溶液：称取 20g柠檬酸(C6H8O7招2O)，加水至100mL ,溶解混匀。 无水乙醇一氨水一水 (7+2+1)溶液：量取无水乙醇 70mL、氨水20mL、水10mL ,混匀。 三正辛胺正丁醇溶液(5 % ):量取三正辛胺 5mL，加正丁醇至100mL，混匀。 饱和硫酸钠溶液。 pH6的水：水加柠檬酸溶液调 pH到6。 但)合成着色剂标准溶液：准确称取按其纯度折算为 100%质量的柠檬黄、日落黄、竟菜红、 胭脂红、新红、赤薛红、亮蓝、靛蓝各0.1000g ,置100mL容量瓶中，加pH6的水到刻度。 此溶液含着色剂 1.00mg / mL。 (15)合成着色剂标准使用液：临用时合成着色剂标准溶液加水稀释 20倍，经滤膜(0.45 ) 过滤。配成每毫升相当 50.0四的合成着色剂。 操作步骤 (1)样品处理 橘子汁、果味水、果子露、汽水等：称取 20.0?40.0g，放入100mL烧杯中。含二氧 化碳样品需要加热以驱除二氧化碳。 配制酒类：称取 20.0?40.0g，放l00mL烧杯中，加小碎瓷片数片，加热驱除乙醇。 硬糖、蜜饯类、淀粉软糖等：称取 5.00?10.00粉碎样品，放人l00mL小烧杯中，加 水30mL，温热溶解，若样品溶液 pH较高，用柠檬酸溶液调 pH到6左右。 巧克力豆及着色糖衣制品：称取 5.00?10.00g放入100mL小烧杯中，用水反复洗涤 色素，到巧克力豆无色素为止，合并色素漂洗液为样品溶液。 (2)色素提取 聚猷胺吸附法：样品溶液加柠檬酸溶液调 pH至6,加热至60 C,将1g聚猷胺粉加少 许水调成粥状，倒入样品溶液中，搅拌片刻，以 G3垂熔漏斗抽滤，用 60 C pH4的水洗涤 3?5次，然后用甲醇一甲酸混合溶液洗涤 3?5次(含赤薛红的样品用液一液分配法处理 )， 再用水洗至中性，用乙醇一氨水一水混合溶液解吸 3?5次，每次5mL ,收集解吸液，加乙 酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至 5mL经滤膜(0.45 )过滤，取10也。进行HPLC 分析。 图8—6八种着色剂色谱分离图 1.新红；2.柠檬黄；3.竟菜红； 4.靛蓝；5.胭脂红；6.日落黄； 7.亮蓝；8.赤薛红 液一液分配法(适用于含赤薛红的样品)：将制备好的样品溶液放入分液漏斗中， 加2mL 盐酸、三正辛胺正丁醇溶液(5 % )10?20mL，充分振摇提取，静置分取有机相，重复提取2? 3次，每次10mL，直至有机相无色，合并有机相，用饱和硫酸钠溶液洗 2次，每次10mL , 分取有机相，放于蒸发皿中，水浴加热浓缩至 10mL，转移至分液漏斗中，加 60mL正己烷， 混匀，加氨水提取 2?3次，每次5mL，合并氨水溶液层(含水溶性酸性色素)，用正己烷洗 2?3次，分取氨水层加乙酸调成中性，水浴加热蒸发至近干，加水定容至 5mL。 经滤膜(0.45皿)过滤，取10也进高效液相色谱仪。如图 8 — 6所示。 高效液相色谱分析参考条件 色谱柱：YWG-C18 , 10 pm 不锈钢柱，4.6mm 250mm 。 流动相：甲醇一乙酸铉溶液 (0.02 mol /L)(pH4)。 梯度洗脱：用浓度为20 %?35%的甲醇洗脱5min ;用浓度为35 %?98 %的甲醇5min ; 用浓度为9