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精液稀释液配制及精液稀释 一、实验目的 掌握稀释配制的基本程序和操作方法。 二、实验材料 主要用品：250ml三角瓶、250ml烧杯、100ml量筒、感量为0.1克的天平、 玻璃漏斗、电炉、石棉网、玻璃棒、定性滤纸、消毒纸巾、硫酸纸、灭菌牛皮纸、 橡皮筋、10ml一次性注射器、1ml注射器、5ml注射器、鸡蛋、75%酒精棉球、 葡萄糖、柠檬酸钠、青霉素、链霉素 三、实验内容 1．玻璃用品的清洗与消毒：将所有玻璃用品用洗涤剂洗净，用稀盐酸浸泡 并用自来水冲洗干净后，用蒸馏水冲洗四遍，空干水分，用纸将瓶口包好，放入 120℃干燥箱中干燥1h，放凉备用。 2．天平的标准：用两张圆形硫酸纸放在天平的左右托盘上，校准天平。 3．称量药品：称取配方需要量的药品，并放入大烧杯中 4．溶液配制：用量筒量取双蒸水100ml，加入烧杯中，用磁力搅拌器或玻 璃棒搅拌使其溶解。 5．用一层定性滤纸过滤溶液至三角瓶中 6．在三角瓶上加牛皮纸盖并橡皮筋固定，放在盖有石棉网的电炉上加热至 沸腾，迅速将其取下，放凉。制成基础液。基础液如果不马上使用可放入在2～ 5℃冰箱中备用，保存时间不超过12h。 7．取卵黄液：新鲜鸡蛋用75%的酒精棉球消毒外壳，待其完全挥发后，将 鸡蛋磕开，分离蛋清、蛋黄和系带，将蛋黄盛于鸡蛋壳小头的半个蛋壳内，并小 心地将蛋黄倒在用四层对折（8层）的消毒纸巾上。小心地使蛋黄在纸巾上滚动， 使其表面的稀蛋清被纸巾吸附。先用针头小心将卵黄膜挑一个小口，再用去掉针 头的10ml的一次性注射器，从小口慢慢吸取卵黄，尽量避免将气泡吸入，同时 应避免吸入卵黄膜。吸入10ml后。再用同样的方法吸取另一个鸡蛋的卵黄。也 可将卵黄移至纸巾的边缘，用针头挑一个小口，将卵黄液缓缓倒入量筒中，注意 避免将卵黄膜倒入量筒中。 低温 （2～5℃）保存液 冷冻保存液 葡萄糖 （一水） 3.3g 8.8 基础液 柠檬酸钠 （二水） 1.4g ～ 双蒸馏水 100ml 100ml 低温保存 基础液 80 ml 80ml 或第一液 卵黄 20ml 20ml 第一液 47ml 第二液 甘油 3ml 羊精液稀释液推荐配方： 牛精液冷冻精液稀释液推荐配方举例： 细管冷冻精液稀释液配方 11%乳糖或12%蔗糖73ml 卵黄20ml 甘油7ml 青霉素10万单位 链霉素10万单位 8．卵黄液与基础液的混合：取80ml放凉的基础液，加入三角瓶中，然后将 卵黄液注入或将卵黄液从量筒中倒入三角瓶中，将量取的80ml基础液反复冲洗 量筒中的卵黄，使其全部溶解入基础液中，然后将全部的基础液倒入三角瓶中。 摇匀。 9．加入抗生素：分别用1ml注射器吸取基础液1ml，分别注入80万单位和 100万单位的青霉素和链霉素瓶中，使其彻底溶解。分别从青霉素瓶中吸取0.1～ 0.12ml和链霉素瓶中吸取0.1ml，将其注入三角瓶中，并摇匀。另一种方法是， 是称取0.1克的青霉素和0.1克的链霉素加入三角瓶中，摇匀。用基础液、卵黄 液和抗生素混合制成第一液。 10．第二液的制作：用量筒量取第一液47ml，加入另一只三角瓶中，用注 射器