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几种药物对大肠杆菌的敏感性测定
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几种药物对大肠杆菌的敏感性测定
摘要:大肠杆菌的抗原性复杂,毒力因子多种多样,不同血清型、不
同毒力因子菌株的宿主范围和致病性大不相同, 可在不同的动物或在
同种不同年龄的动物中引起多种多样的疾病。 通过采用不同的抗菌药
物对鸡大肠杆菌病进行治疗, 结果表明,该菌对头孢噻肟、 庆大霉素、
阿米卡星、氧氟沙星和卡那霉素敏感。
【实验目的】
通过检测抑菌圈大小测定大肠杆菌对氟苯尼考、 头孢噻呋呐、 硫酸
新霉素可溶粉、氧氟沙星和卡那霉素几种药物的敏感程度。
【实验原理】
纸片法药敏试验是将抗菌药物吸收到特定的纸片中, 然后置于已接
种待测定菌的固体培养基上, 抗菌药物通过向培养基内的扩散, 抑制
敏感细菌的生长, 从而出现抑菌环 (带)。由于药物扩散的距离越远,
达到该距离的药物浓度越低, 故可以根据抑菌环的大小, 判断细菌对
药物的敏感度。 通过药物敏感试验, 我们可以找出针对于某些致病菌
的敏感药物,从而对临床中的细菌性疾病的治疗提供指导。
【实验材料】
1、药品及细菌——氟苯尼考、头孢噻呋呐、硫酸新霉素(杆菌净) 、
氧氟沙星和卡那霉素等抗菌药物,生理盐水,磷酸盐缓冲溶液, MH
营养肉汤, MH 培养基,麦康凯培养基,蒸馏水,大肠杆菌
2、器材——纸片,试管,移液器,酒精灯,高压蒸汽锅,无菌操作
台,镊子,剪刀,锥形瓶,烘箱,培养箱,天平,玻璃棒,干净毛巾
(报纸),炭笔,接种环,小广口瓶
【实验方法及内容】
1.药敏纸片的制作
1.1 制备方法:取新华 1 号定性滤纸,用打孔机打成 6 毫米直径的
圆形小纸片。取圆纸片 50 片放入清洁干燥的小广口瓶中,瓶口以单
层牛皮纸包扎。 经 15-20 分钟高压消毒后, 放在 37℃温箱或烘箱中数
天,使完全干燥。
1.2 抗菌药纸片制作:在上述含有 50 片纸片的小广口瓶内加入药液
0.25 毫升(因不好取材,故扩大十倍配药。 ),并翻动纸片,使各纸片
充分浸透药液, 翻动纸片时不能将纸片捣烂。 同时在瓶口上记录药物
名称,放 37℃温箱内过夜,干燥后即密盖,如有条件可真空干燥。
切勿受潮,置阴暗干燥处存放,有效期 3-6 个月。
2.药液的制备(用于商品药的试验) :按商品药的使用治疗量的比例
配制药液;如商品药百病消按其说明量治疗量 0.01%饮水,可按这个
比例配制药液, 可取 10 毫克加入 10 毫升的水中混匀。 此稀释液即为
用于做药敏试验的药液。
3.培养基的制备
3.1 普通肉汤的制备
蛋白胨 2g 杭州微生物试剂有限公司
牛肉膏 0.6g 成都长寿生物利剂有限公司
Nacl 1g 成都市科龙化工试剂厂
水 200ml
PH 7.4
按上述要求称取各种成分于三角瓶中,混合均匀,用 NaOH调 PH 至
7.4,调好 PH后其瓶口用报纸封好, 至于高压蒸汽灭菌中灭菌
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