免疫学检的测技术基本原理.pptVIP

免疫学检的测技术基本原理.ppt

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第二十二章 免疫学检测技术的基本原理 第一节体外抗原抗体结合反应的 特点及影响因素 (一)抗原抗体反应的特点 高度特异性 2.表面化学基团之间的可逆结合 3.适宜的抗原抗体浓度和比例 4.抗原抗体反应的两个阶段 1.高度特异性 抗原表位与抗体分子的超变区互补结合 抗体检测抗原: 抗伤寒杆菌的抗体:检测伤寒杆菌 抗原检测抗体 乙肝病毒:检测乙肝病毒抗体 2.表面化学集团之间的可逆结合 抗原抗体之间:非共价键结合 结合不稳定,易受温度、酸碱度和离子 强度的影响 3.适宜的抗原抗体浓度和比例 抗原或抗体过剩,形成的IC复合物体 积小,数量少,肉眼不可见; 抗原抗体浓度和比例适当:IC复合物 体积大,数量多,肉眼可见。 4.抗原抗体反应的两个阶段 第一阶段:数秒至数分,形成小的IC; 第二阶段:数分、数小时至数日,形成 较大IC复合物。 (二)抗原抗体反应的影响因素 1.电解质 2.温度 3.酸碱度 1.电解质:离子强度 在适当浓度的电解质中:抗原抗体易结 合为肉眼可见的凝聚物或沉淀物。 实验中常用0.85%的NaC等离子溶液作 稀释液。 2.温度 体温或稍高于体温 37C是抗原抗体反应的最适温度。一般常 使用反应在37c水浴或孵育箱中进行。 3.酸碱度 最适酸碱度:pH6-8 第二节检测抗原和抗体的 体外实验(体液免疫检测) 血清学试验:抗原和其相应的抗体在体外相遇可发生特异 性结合,用已知的抗体(或抗原)检测未知的抗原(或抗 体),用于疾病的诊断。因为实验所釆用的抗体常存在于血 清或体液中(关节液、脑脊液、胸水及腹水),将体外的抗 原-抗体反应称为血清学反应 1.凝集反应 2.沉淀反应 3.免疫标记技术 4.蛋白质芯片技术

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