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子情境:谷氨酸发酵过程控制-发酵罐溶氧的控制 在谷氨酸发酵过程中为什么需要通氧? 谷氨酸发酵的生产菌是好氧菌吗? 谷氨酸发酵过程中通入的氧气微生物都能利用吗? 溶氧对发酵的影响和及其控制 氧是一种难溶于水的气体。在25℃,1×105Pa条件下,纯氧在水中的溶解度为1.26mmol/L,空气中的氧在纯水中的溶解度更低(0.25mmol/L)。在28℃氧在在发酵液中的溶解度只有0.22 mmol/L,而发酵液中的大量微生物耗氧迅速(耗氧速率大于25~100 mmol/L.h),因此,供氧对于好氧微生物来说是非常重要的。在对数生长期,即使发酵液被空气饱和,若此时停止供氧,发酵液中溶氧可在几分钟之内便耗尽。 在好氧深层培养中,氧气的供应往往是发酵能否成功的重要限制因素之一。 好氧微生物的生长和代谢活动都需要消耗氧气,它们只有在氧分子存在的情况下才能完成生物氧化作用。 液体中的微生物只能利用溶解氧,气液界面处的微生物还能利用气相中的氧。强化气液界面也将有利于供氧。 在微生物的培养过程中,应保持供氧与耗氧的平衡,满足微生物对氧的利用。 (1)临界氧 发酵生产中用空气饱和度百分数来表示溶氧浓度。这只能在相似的条件下,在同样的温度、罐压、通气搅拌下进行比较。 这种方法能反映菌的生理代谢变化和对产物合成的影响。 临界氧:不影响呼吸所允许的最低溶氧浓度,如对产物而言,便是不影响产物合成所允许的最低浓度。 ★ 呼吸临界氧值可用尾气O2含量变化和通气量测定,也可用溶氧电极测定。 各种微生物的临界氧值: 细菌和酵母:3~10% 放线菌:5~30% 霉菌:10~15% ★合成的临界氧值:考察不同溶氧浓度对生产的影响,便可求得合成的临界氧值。 注意: ●实际上,呼吸临界氧值不一定与产物合成临界氧值相同。 ●生物合成临界氧浓度并不等于其最适氧浓度。 ●在培养过程中并不是维持溶氧越高越好。过高的溶氧对生长可能不利。 (2)溶氧作为发酵异常的指标 生长过程从培养液中溶氧浓度的变化可以反映菌的生长生理状况。 发酵溶氧变化异常,可及时预告生产可能出现的问题。 ★操作故障或事故 ★中间补料是否得当 ★污染杂菌:溶氧会反常地迅速(一般2~5h)跌到零,并长时间不回升。这比无菌试验发现染菌要提前几个小时。但有时会出现染菌后溶氧反而升高的现象。 微生物的“需氧” 可用耗氧速率或呼吸强度来表示: 耗氧速率(oxygen uptake rate):指单位体积的培养液在单位 时间的耗氧量。单位为 mmol O2/(L· h),用 r表示 呼吸强度(respiratory strength):单位质量的细胞干重在单 位时间的耗氧量。单位为 mmol O2/(g ·干细胞 ·h) ,用Qo2表示 两者的关系: (3)溶氧的控制 需氧方面 式中,r——摄氧率,mmol O2/(L·h); QO2——呼吸强度,mmol O2/(g菌·h); X——菌浓,g/L。 若发酵液中溶氧保持不变,即供氧=需氧,则 使供需失去平衡的因子也会改变溶氧浓度。 在发酵工业中,耗氧对于菌体生长和产物生成之间的关系有三种类型: 1、产物生成期的耗氧与菌体生长期的耗氧一致。 2、产物生成期的耗氧超过菌体生长期的耗氧量。 3、产物生成期的最适耗氧量低于菌体生长期的耗氧量。 项目 工艺条件 项目 工艺条件 菌种特性 培养基的性能 好气程度 菌龄、数量 菌的聚集状态,絮状或小球状 基础培养基组成、配比 物理性质;粘度、表面张力等 补料或加糖 温度 溶氧与尾气O2及CO2水平 消泡剂或油 表面活性剂 配方、方式、次数和时机 恒温或阶段变温控制 按生长或产物合成的临界值控制 种类、数量、次数和时机 种类、数量、次数和时机 影响需氧的工艺条件 在发酵过程中,影响耗氧的因素有以下几方面: 1、培养基成分和补料 培养基的成分和浓度显著影响耗氧;培养液营养丰富,菌体生长快,耗氧量大;发酵浓度高,耗氧量大;发酵过程补料或补糖,微生物对氧的摄取量随着增大。 2、菌龄影响耗氧: 呼吸旺盛,耗氧力强,发酵后期菌体处于衰老状态,耗氧能力自然减弱。 3、发酵条件影响耗氧: 在最适条件下发酵,耗氧量大。 发酵过程中,排除有毒代谢产物如二氧化碳、挥发性的有机酸和过量的氨,也有利于提高菌体的摄氧量。 式中,dc/dt——单位时间内发酵液溶氧浓度的变化[mmol/(L·h)]
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