抗条锈病小麦—黑麦5R（5B）代换系创制及黑麦5R染色体区段特异分子标记开发.pdfVIP

摘 要 黑麦5R 染色体带有小麦条锈病抗性基因，具有育种价值。本研究利用 Ku Ku Ku SLAF-sequence 测序技术和小麦-黑麦 MA1R -MA7R 单体附加系开发黑麦5R 染色 Ku 体特异分子标记，利用非变性荧光原位杂交 （ND-FISH）技术鉴定小麦-黑麦5R (5B) 代换系及黑麦5RKu 缺失系，并考察它们的条锈病抗性；利用5RKu 缺失系对5RKu 特异 Ku 标记和条锈病抗性基因进行染色体区段定位；另外，对获得的5R (5B)二体代换系的染 色体的减数分裂行为进行了观察，对其自交后代进行了ND-FISH 鉴定，结果如下： Ku 1. 开发了114 对5R 染色体特异分子标记； I I Ki Ki 2. 使用小麦-黑麦二体附加系DA1R-7R 、DA1R -7R 和单体附加系 MA1RPI613196-7RPI613196 5RKu 100 及其黑麦亲本对 特异分子标记进行多态性验证，其中 个 标记具有多态性； Ku Ku Ku 3. 鉴定出了5R (5B)二体代换系、5RL (5B)双端体代换系、5RS (5B)单端体代 Ku Ku 换系、5RS .5BL 易位系以及4种5R 缺失系。根据探针Oligo-pSc119.2-1、Oligo-pSc200 Ku 和Oligo-pSc250 的信号位点以及缺失系的断裂位点，将5R 染色体分为S1、S2.1、S2.2、 L1.1 L1.2 L2.1 L2.2 L3.1 L3.2 4 5RKu S1-S2.1 、 、 、 、 和 九个区段。 种 缺失系分别缺失了 、 L1.2-L3.2、L2.2-L3.2 和L3.2 区段。因此将这4 种缺失系分别命名为DEL5RSS1-S2.1、 L1.2-L3.2 L2.2-L3.2 L3.2 Ku DEL5RL 、DEL5RL 和DEL5RL 。利用这些缺失系，将5R 特异分子标 记分别定位到S1-S2.1、S2.2、L1.1、L1.2-L2.1、L2.2-L3.1和L3.2 六个区段； Ku Ku 4. 对所获得的材料进行了条锈病的抗性鉴定，结果表明：5R 单体附加系、5R (5B) Ku S1-S2.1 L2.2-L3.2 二体代换系、5RL (5B)双端体代换系、DEL5RS 缺失系、DEL5RL 和 L3.2 Ku Ku L1.2-L3.2 DEL5RL 中抗条锈病，5RS .5BL 易位系、5RS (5B)单端体代换系和DEL5RL 缺失系都高感条锈病，因此将抗条锈病基因初