基于线粒体DNA tRNAleuCOⅡ序列的川西地区东方蜜蜂保护遗传学研究.pdfVIP

摘要 东方蜜蜂（Apis cerana ）在分类学上属昆虫纲（Insecta ）、膜翅目（Hymenoptera ）、 蜜蜂科（Apidae ）、蜜蜂属（Apis ）。我国境内除新疆以外，大部分地区都有东方蜜蜂 的分布，但是受到西方蜜蜂 （Apis melliffera ）以及人类活动的影响，我国东方蜜蜂的 分布范围和种群数量明显减少，遗传资源破坏较严重。目前，四川省已成为我国东方 蜜蜂主要分布区之一。本研究选取了四川省23 个地理种群411 个东方蜜蜂个体，利 用线粒体DNA tRNAleu~COII 片段序列作为分子标记，对东方蜜蜂的遗传多样性、遗 传结构、种群历史动态等方面进行分析，主要研究结果如下： 试验成功扩增出长度为436 bp 的东方蜜蜂mtDNA tRNAleu～COII 基因片段，该 段序列A+T 的平均含量为85.10 ％，C+G 的平均含量为14.91％，说明此段为A+T 富 集区；该段序列共存在58 个变异位点，包括26 个简约信息位点，27 个单突变位点 和5 个碱基缺失位点，共定义了53 个单倍型。对23 个地理种群进行遗传多样性分析， 发现平均核苷酸差异数（K ）为1.895，核苷酸多样度（Pi ）为0.00440，单倍型多样 性（Hd ）为0.886 ；错配分析及中性检验表明23 个东方蜜蜂种群整体上处于群体扩 张状态。 在遗传分化研究中，23 个种群间的遗传距离 （D ）在0.0020～0.0136 范围内，遗 传分化系数（Fst ）在-0.103～0.549 范围内，基因流（Nm ）的数值在0.205～+ ∞之间。 遗传分化系数 （Fst ）和基因流 （Nm ）表明，群体间具有较大的基因流动；AMOVA 分析表明东方蜜蜂mtDNA 序列的变异主要发生在群体内，种群间呈中等水平的遗传 分化；网络中介图与系统发育树表明单倍型聚类具有明显的系统地理格局；AMOVA 层次分析表明，把[稻城，得荣，巴塘，九龙]归为一类、[新龙，康定，丹巴，道孚， 泸定，小金，金川，马尔康，黑水，理县，汶川，宝兴，邛崃]归为一类、[茂县，青 川，苍溪，富顺，石棉]归为一类、[冕宁]单独归为一类时，23 个地理种群之间的组 间变异值（Fct ）最大。根据综合结果，将位于川西地区东方蜜蜂的地理种群划分成2 个进化显著单元 （ESU ），第一个进化显著单元包括：稻城、得荣、巴塘和九龙；第 二个进化显著单元包括：新龙、康定、丹巴、道孚、泸定、小金、金川、马尔康、黑 水、理县、汶川、宝兴和邛崃。 本研究首次大规模的分析了川西地区东方蜜蜂mtDNA tRNAleu～COII 基因序列 I 的差异，揭示了种群的遗传多样性及历史动态，阐述了种群间的遗传分化和遗传结构， 并最终确定了 2 个 ESU，为四川省中蜂的资源保护提供了一些初步的资料。在今后 的课题研究中还会采用全基因组、SSR 等分子标记进行探讨，争取用最短的时间解决 我国东方蜜蜂的种群现状，从而更好的保护和利用我国东方蜜蜂的种质资源。 关键词：东方蜜蜂；线粒体DNA ；保护遗传学；遗传多样性 II Abstract Apis cerana belongs to genus Apis , family Apidae, order Hymenoptera, class Insecta. Except for Xinjiang, most areas in China have the distribution of Apis cerana . However, due to the influence of Apis melliffera and human activities, the distribution range and population of Apis cerana in China had reduced, and the genetic resources had damaged. At present, Sichuan Province has become one of the main distribu