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3.1 类新药克利贝特人体药代动力学研究 克利贝特是一种苯氧芳酸衍生物类调血脂药物， 其降脂作用较安全有效， 临 床主治各种类型的高脂血症，由日本住友公司研发， 1981 年首次在日本上市， 收载于日本药局方 14 版，降血脂作用在同样情况下比氯贝丁脂高 10 倍。药动学 口服吸收好，并具有抗血栓作用，是广谱的全身性脂质调节剂。 目前，我国尚无该产品的生产和供应。 目的：目前关于克利贝特的人体药代 动力学研究鲜有报道。 本研究拟采用高效液相色谱法 (HPLC)建立检测人血浆中克利贝特的方法， 应 用于血浆中克利贝特的测定， 计算相应的药代动力学参数。 采用高效液相色谱法 串联质谱法 (LC-MS/MS)建立检测人尿样中克利贝特的方法，并采用该方法测定尿样中克利贝特的浓度，从而进行克利贝特尿样药代动力学特征研究。 我们将对中国健康受试者口服克利贝特片后的药代动力学进行研究，旨在为 该药在中国的临床用药提供依据。方法：第一部分建立 HPLC检测血浆中克利贝特方法并进行方法学验证。 试验步骤：精密量取血浆 0.2mL，加入非诺贝特内标（ 100μg·mL-1）20μ L，涡旋混匀。加入 0.6mL 乙腈： 1mol·L-1 盐酸 =(95:5) 沉淀剂，涡旋 3 分钟， 将离心机转速调至 16000r min-1 ，离心 10min，取上清液放置到自动进样器样品 瓶中，进样量为 20μL。 采用 DIKMA Inspire C18(150mm ×4.6mm I.D) 色谱柱，流动相为乙腈 - 水溶 液（ 73：27，v/v ，含 0.4%磷酸）；流速： 1.0mL· min-1 ；柱温： 35° C。第二部 分建立 LC-MS/MS检测尿样中克利贝特方法并进行方法学验证。 试验步骤：精密量取血浆 0.2mL，加入非诺贝特内标（ 2.024 μg·mL-1）30 L，涡旋混匀。加入 0.6mL 乙腈：1mol·L-1 盐酸 =(95:5) 沉淀剂，涡旋 3 分钟，将离心机转速调至 16000r ·min-1 ，离心 10min，取上清液置到自动进样样品瓶中，进样量为 5μL。 采用 DIKMA Inspire C18(150mm ×4.6mm I.D) 色谱柱，流动相为甲醇 - 水溶液（ 90： 10，v/v ，含 0.1%甲酸， 10mmol/L 醋酸铵）；流速： 0.6mL· min-1 ；柱温：35°C。检测离子： 克利贝特 m/z486.29 →175.00, 内标非诺贝特： m/z361.10 233.10 ；雾化气流速： 12L·min-1 ；干燥气压力： 40psi ；毛细管电压： 4KV； 干燥器温度： 350°C；裂解电压：克利贝特 150V，非诺贝特 120V；碰撞能：克利贝特 28V，非诺贝特 14V。 第三部分血浆中克利贝特单次给药药代动力学及饮食影响研究。共筛选出 36 名健康受试者，分为低剂量组单次服用克利贝特片 200mg（ 1 片）、中剂量组 单次服用克利贝特片 400mg（2 片）和高剂量组单次服用克利贝特片 600mg（3 片），每组男女各半，各 12 人。 健康受试者于早上空腹给药前抽取空白血浆 5ml，之后用 250ml 的温开水送 服克利贝特，为了防止药物被稀释，服药以后 2h 内不能饮水，在给药 0.5,1,2,3,4,5,6,8,12,24,36,48,60 和 72h 分别采集静脉血 5ml，将采集出来的 血液立刻置于抗凝试管中，将离心机转速调至 4000r ·min-1 ，离心 5min，离心 后将所得血浆放在肝素抗凝试管中，于 -80 °C 保存。中剂量组的 12 名受试者， 采用标准两阶段自身对照试验设计，随机分为 I 、II 两组，每组男女各半，各 6 人。 试验分两个阶段： 第一阶段 I 组空腹 10h 口服克利贝特 400mg，II 组在高脂 肪、高卡路里餐后口服克利贝特 400mg，在给药前抽取空白血 5ml，给药后 0.5,1,2,3,4,5,6,8,12,24,36,48,60 和 72h 分别采集静脉血 5ml，将采集出来的 血液立刻置于抗凝试管中，将离心机转速调至 4000r ·min-1 ，离心 5min，离心 后将所得血浆置肝素抗凝试管中，于 -80 ° C保存。经过一周清洗期两组交换进 行第二阶段试验，I 组餐后口服克利贝特 400mg，II 组空腹口服克利贝特 400mg， 其余同第一阶段。 第四部分尿样中克利贝特药代动力学研究。 低剂量组健康受试者在进行血浆 中药代动力学研究的同时考察受试者服用克利贝特片后的尿药排泄情况。 给药前收集一次空白尿样，在给药后 0-2 、2-4 、4-6 、6-8 、8-12 、12-24h 、 24-48h