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D- 二聚体的检测及临床意义
近年由于血栓性疾病的增多, 检验医学即时检验 (POCT) 在免疫测定技术方面,特别是在出凝血和血栓性疾病的研究上取得了
重大的进展。 D- 二聚体的检测方法,从传统的定性试验,变为简
单快速准确定量的即时检验。金标全定量快速检测对于血栓性疾
病的及时准确诊断、以及对溶栓治疗的疗效监测,是必不可少的
重要指标。
一、 D- 二聚体的形成
正常人纤溶酶和抑制酶之间保持了动态平衡,使血液循环能正常进行。人体内的纤溶系统,对保持血管壁的正常通透性;维
持血液的流动状态和组织修复,起着重要作用。为维护正常生理
状态,在外伤或血管受损的情况下,血栓的形成可防止血液从损
伤的血管中流失。
病理状态下,机体发生凝血时,凝血酶作用于纤维蛋白,转
变为交联纤维蛋白,同时纤溶系统被激活,降解纤维蛋白形成各
种碎片。 γ链能把二个含 D 片断的碎片连接起来, 形成 D- 二聚体。
D- 二聚体水平的上升,代表血块在血管循环系统中形成, 急性
血栓形成的一个敏感的标记物。 但不具特异性 ;下列因素如外科手
术、创伤、感染、发炎、怀孕、产后等,也会导致凝血酶的产生
使 D-D 水平的上升 。
D- 二聚体的升高反映了体内存在着凝血及纤溶活性增强的
重要分子标志物。因此它既可反映体内存在着血栓或继续形成的
状况,又可反映体内纤溶活性增强的指标,因为纤维蛋白降解产
物中,唯有 D- 二聚体可反映血栓形成后的溶栓活性, 对于临床血
栓性疾病的诊断和溶栓治疗有着极其重要的价值。
二、 D- 二聚体检测的方法学的进展
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1 、三 P 试验: FDP 碎片 X 和可溶性纤维蛋白单体 FM 复合物的
定性试验。
缺点:敏感性差, DIC 阳性率 30-60% ,试验时间长,干扰
因素多,采血不顺,溶血均可影响结果,只能定性不能定量。
2 、胶乳凝集法: 简单快速
缺点:敏感性低,定性或定量倍比稀释,费试剂,重复性差。
3 、 ELISA 法: 敏感性高,能定量
缺点:操作烦,时间长,无法满足急诊需求。
、免疫渗滤胶体金显色反应法:
采用同种单克隆抗体夹心,即以包被的抗体捕获血浆中抗原
D- 二聚体)加入偶联有胶体金的同种抗体显色。 抗体特异性高,可与含 D- 二聚体的多种片断结合可提高试验的敏感度。
特点:定量报告,快速简便,敏感性高。
测试范围: 0.1 — 5mg/L
正常参考值: 0.3mg/L ,接近或 0.3mg/L 应考虑疾病状
态。
使用说明:
血浆未经彻底离心,血浆中含有白细胞、血小板、高血脂或高粘度血浆,这些物质停留在检测板的膜表面,导致渗滤减慢时
间过长, 可能出现假性高值, 应彻底离心 (4000 转 20 分钟为宜 ),并小心吸取血浆。
各个不同厂家的 D- 二聚体试剂盒的正常参考范围值也不一
样,有的以< 0.3mg/L 为正常,而有的试剂盒以< 0.6mg/L 为正常。此外有的以 PEU 单位模式报告,有的以 mg/L 的模式报告,其值正好相差一半。 所以在评价 D- 二聚体结果时应注意上述问题。
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三、 D- 二聚体检测的临床应用
D- 二聚体增高提示了与体内各种原因引起的血栓性疾病相
关。同时也说明了纤溶活性的增强;临床上常见于弥慢性血管内
凝血( DIC )、深静脉血栓( DVT )、肺栓塞( PE )、急性心肌梗
塞、脑梗塞、恶性肿瘤、卵巢癌、肺癌、败血症、肝病、妊高征
孕妇、先兆子痫、烧伤、外科手术、创伤和脓毒血症等均可使
D- 二聚体升高,但是 D- 二聚体检测的升高并不能说明血栓形成
的原因及位臵,必须结合临床和其他检测分析结果。
1 、DIC (休克、系统感染、外伤、先兆子痫、恶性疾病和烧
伤等)的并发症: 血液在全身微小血管内广泛性凝固,形成以血小板和纤维蛋白为主要成分的微血栓。此过程消耗了大量的血小
板和凝血因子,并通过激活途径激活了纤溶系统。微血栓中交联
纤维蛋白被纤溶酶降解而产生大量高于正常百倍的 D- 二聚体。与
其他诊断 DIC 的指标相比较, D- 二聚体是唯一直接反映凝血酶
和纤溶酶生成的理想指标;诊断 DIC 的特异性也早于其他指标。
2 、深静脉血栓( DVT )的筛查: 血浆 D- 二聚体阴性可排除
DVT 的可能性。 造影证实 DVT 者 D- 二聚体 100% 阳性,可做溶
栓治疗和肝素抗凝的用药指导及疗效观察。静脉栓塞是临床上最
常见的静脉疾病,临床医生无法仅仅根据其临床症状作出诊断。
静脉造影是诊断静脉栓塞的黄金标准,它是创伤性检查,费
用高,而静脉造影本身具有引发深静脉栓塞或其它并发症的危险性。
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静脉血栓栓塞症 (VTE) 的危险因素
较低的危险因素
中度危险因素
高危险因素
卧床3日
膝关节手术
骨折(髋或腿)
长时间的
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