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- 2020-10-29 发布于未知
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绪论
分子生物学的发展简史
Schleiden 和 Schwann 提出“细胞学说”
孟德尔提出了“遗传因子”的概念、分离定律、独立分配规律
Miescher 首次从莱茵河鲑鱼精子中分离出 DNA
Morgan 基因存在于染色体上、连锁遗传规律
Avery 证明基因就是 DNA 分子,提出 DNA 是遗传信息的载体
McClintock 首次提出转座子或跳跃基因概念
Watson 和 Crick 提出 DNA 双螺旋模型
Crick 提出了“中心法则”
Meselson 与 Stah 用N 重同位素证明了 DNA 复制是一种半保留复制
Jacob 和 Monod 提出了著名的乳糖操纵子??型
Arber 首次发现 DNA 限制性内切酶的存在
Temin 和 Baltimore 发现在病毒中存在以RNA 为模板,逆转录成 DNA 的逆转录酶
哪几种经典实验证明了 DNA 是遗传物质? (Avery 等进行的肺炎双球菌转化实验、Hershey 利用放射性同位素 35S 和 32P 分别标记 T2 噬菌体的蛋白质外壳和 DNA)
第二章 染色体与 DNA
第一节 染色体
一、真核细胞染色体的组成;;中期染色体由着丝粒、染色体臂、次缢痕、随体、端粒(由重复的寡核苷酸序列构成)
5 部分组成。;;L(Linking number):连环数或称拓扑环绕数,指 cccDNA 中一条链绕另一条链的总次
数。其特点是:(1) L 是整数;(2)在 cccDNA 中任何拓扑学状态中其值保持不变;
(3)右手螺旋对 L 取正值。
T(Twisting number):缠绕数,DNA 一条链绕另一条链的扭转数即双螺旋的圈数。其 特点:(1) 可以是非整数 (2) 是变量;
W(Writhing number):扭曲数,即超螺旋数,指双螺旋分子在空间上相对于双螺旋轴
的扭曲。特点是:(1)可以是非整数(2)是变量;
I 型:转变超螺旋为松弛状态 拓扑异构酶(改变 DNA 拓扑异构体的L 值) II 型:引入负超螺旋同I 型;;1;;真核生物 DNA 复制的起始需要起始原点识别复合物(ORC)参与
在真核生物中主要有 5 种 DNA 聚合酶(α、β、γ、δ、ε),一半都不具有 核酸外切酶活性。
端粒的复制:依赖于端粒酶(逆转录酶,由蛋白质和 RNA 组成);10;11;转座机制:;13;合,识别转录终止信号。
(二) 真核;大肠杆菌中的两类终止子:
强终止子:发夹结构, 3′端上有 6 个U
弱终止子 -需要ρ因子
原核生物 RNA 的合成
分为起始,延长、终止三个阶段 转录起始不需要引物
RNA 按 5’~3’方向延伸
真核生物转录过程与原核生物的不同点
转录在细胞不同位置进行
原核只有一种RNA 聚合酶,而真核细胞有三种聚合酶;
启动子的结构特点不同,真核有三种不同的启动子和有关的元件;
真核生物RNA 聚合酶自身不能识别和结合到启动子上,需要转录因子先于启 动子结合后才能结合上去。
RNA 转录后加工;tRNA 加工:与原核生物不同的一点是先将内含子切除,再由连接酶将外
显子连接
mRNA 加工:一个结构基因转录成一个 mRNA 分子且内含子与外显子一起被 转录
包括:5’末端加帽子、3’端多聚A 尾、剪接去除内含子将外显子 连接 ;;;19;20;21;;状态,即在某些物质的诱导下使基因活化。
? 调节分解代谢的操纵子,同时受cAMP-CAP 的活性调节——乳糖操纵子;是指当葡萄糖和其它糖类一起作为细菌的碳源时葡萄糖总是优先被利用,葡萄糖
的存在阻止了其它糖类的利用的现象。
2、降解物对基因活性的调节
葡萄糖通过降低cAMP 的含量而抑制基因表达
操纵子:由操纵基因以及相邻的若干结构基因所组成的功能单位,其中结构基因 转录受操纵基因控制;1、Z、Y、A 基因的产物为一条多顺反子mRNA
lacZ:编码β-半乳糖苷酶,它可以将乳糖水解为半乳糖和葡萄糖;
lacY:编码半乳糖苷透性酶,它能将乳糖运送透过细菌的细胞壁; lacA:编码硫代半乳糖苷乙酰转移酶,进行乳糖代谢。
2、O 区就是阻遏物结合区
3、lac P(启动子区):从 I 基因结束到mRNA 转录起始位点止,有cAMP-CAP
结合区
4、cAmp-CAP
代谢激活蛋白(CAP )是cAmp 的受体蛋白(CRP)
cAmp-CAP 复合物,是lac 操纵元的正调控因子
5、葡萄糖对lac 操纵子的影响
葡萄糖存在时腺苷酸环化酶活性降低,ATP 无法转变成cAMP,不能形成 CAP-cAMP 复合蛋白,RNA 酶无法结合在 DNA 上,结构基因不表达。
代谢物阻遏效应
研究认为葡萄糖的某些降解产物抑制lac mRNA 的合成,这种效应称之为代谢 物阻遏
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