免疫标记技术[推荐].pptVIP

荧光抗体技术的原理与方法 直接法 间接法 补体法 双标记法 * 精品PPT·可编辑借鉴 * 精品PPT·可编辑借鉴 精品PPT·可编辑借鉴 * 精品PPT·可编辑借鉴 精品PPT·可编辑借鉴 * 精品PPT·可编辑借鉴 精品PPT·可编辑借鉴 * 精品PPT·可编辑借鉴 精品PPT·可编辑借鉴 * 精品PPT·可编辑借鉴 精品PPT·可编辑借鉴 * 精品PPT·可编辑借鉴 精品PPT·可编辑借鉴 精品PPT·收集整理 Immunolabeling technique * 精品PPT·可编辑借鉴 第一节 免疫标记技术的基本概念 一、免疫标记与标记免疫的概念 二、常用的免疫标记物质 * 精品PPT·可编辑借鉴 免疫标记与标记免疫 免疫标记技术： 标记物与免疫活性物质的联接技术 标记免疫技术： 以标记免疫物质检测相应靶物质的技术 * 精品PPT·可编辑借鉴 免疫标记技术 = 抗原抗体反应 示踪物标记 灵敏性 特异性 免疫标记技术的主要特点： 高特异性、高灵敏性 免疫技术+ 标记技术 酶 荧光素 同位素 其它 * 精品PPT·可编辑借鉴 常用的免疫标记物质 类别 标记物 用途 荧光素 FITC、RB200、TRITC 免疫组化 镧系元素螯合物 免疫分析测定 放射性核素 3H、14C、32P、57Gr 免疫分析测定 125I、131I 酶 HRP、AP 免疫组化 免疫分析测定 化学发光物 Luminol、lucigenin 免疫分析测定 金属颗粒 胶体金、铁蛋白 免疫组化 免疫分析测定 * 精品PPT·可编辑借鉴 第二节 标记免疫技术的分类 一、按指示标记物质划分的类型 二、按测定方式划分的类型 三、按测定用途划分的类型 * 精品PPT·可编辑借鉴 1、酶免疫技术 2、荧光免疫技术 3、放射免疫技术 4、金免疫技术 按指示标记物质划分的类型 * 精品PPT·可编辑借鉴 1、均相型（homogenous） 2、非均相型（heterogeneous） 按测定方式划分的类型 * 精品PPT·可编辑借鉴 均相型（homogenous） 非均相型（heterogeneous） * 精品PPT·可编辑借鉴 1、免疫测定技术 2、免疫组化技术 按测定用途划分的类型 * 精品PPT·可编辑借鉴 第三节 酶标记技术 一、常用标记方法 二、标记免疫物的分离与鉴定 * 精品PPT·可编辑借鉴 常用标记方法 1、常用酶 辣根过氧化物酶（HRP） 碱性磷酸酶（AP） 2、标记方法 戊二醛交联法 过碘酸盐氧化法 * 精品PPT·可编辑借鉴 戊二醛交联法 (一步法） 抗体-NH2 + COH-（CH2）3-COH + NH2-酶 抗体-NH2 =CH-（CH2）3-CH = NH2-酶 抗体-NH2 =CH-（CH2）3-CH = NH2-抗体 酶-NH2 =CH-（CH2）3-CH = NH2-酶 * 精品PPT·可编辑借鉴 戊二醛交联法（二步法） COH-（CH2）3-COH + NH2-酶 抗体-NH2 + CHO-（CH2）3-CH = NH2-酶 抗体-NH2 =CH-（CH2）3-CH = NH2-酶 * 精品PPT·可编辑借鉴 过碘酸盐氧化法 O O O O O O NaIO4 O O OH O O OH OH + NH2抗体 O O O N N 抗体 抗体 H2O N 抗体 NaBH4 Schiff碱 酶-五炭糖环 * 精品PPT·可编辑借鉴 标记免疫物的分离与鉴定 1、分离 目的：去除游离酶 方法：盐析、柱层析 2、鉴定 抗体活性