大肠杆菌热击感受态细胞的制备、注.docxVIP

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2020-11-04 发布于天津
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大肠杆菌热击感受态细胞的制备、注.docx

大肠杆菌感受态细胞的制备和转化大肠杆菌感受态细胞制备的原理大肠杆菌自然条件下很难进行转化其主要原因是转化因子的吸收较为困难在转化实验中通常先采用人工的方法制备感受态细胞代表性的方法之一是诱导法感受态形成后细胞生理状态会发生改变出现各种蛋白质和酶负责供体的结合和加工等细胞表面正电荷增加通透性增加形成能接受外来的分子的受体位点等诱导对大肠杆菌细胞的转化在的低渗溶液中细菌细胞发生膨胀同时使细胞膜磷脂层形成液晶结构促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来诱导大肠杆菌形成感受态能与加入的分子结合形成抗

PAGE PAGE #/ 4 PAGE PAGE #/ 4 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化大肠杆菌感受态细胞制备的原理：大肠杆菌自然条件下很难进行转化，其主要原因是转化因子的吸收较为困难。在转化实验中，通常先采用人工的方法制备感受态细胞，代表性的方法之一是Ca2+诱导法。感受态形成后，细胞生理状态会发生改变，出现各种蛋白质和酶，负责供体 DNA 的结合和加工等。细胞表面正电荷增加，通透性增加，形成能接受外来的 DNA 分子的受体位点等。 Ca2+诱导DNA对大肠杆菌细胞的转化：在0C的CaCl2低渗溶液中，细菌细胞发生膨胀，同时 CaCI2使细胞膜磷脂层形成

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