中科院生物化学及分子生物学考博补充一.docxVIP

生物膜的运 机制？ 胞膜物 运的方式有 散，易化 散，主 运，出胞与入胞 各自特点和机制 ： 散 ，脂溶性的小分子 物 或离子从膜的高 度 移向低 度一 的 象 称 散。 散的特点是， 不需膜蛋白 帮助， 不消耗 胞自身代 能量， 度差 行， 散 运的物 脂溶性小分子物 易化 散，指水溶性的小分子 物 或离子在膜蛋白 的帮助下从膜的高 度一 移向低 度 一 的 运方式。易化 散的 型有 体 运。 体 运的特点有特异性， 和性， 争性 抑制。 体 运 运的物 ：主要是水溶性小分子有机物 。 主 运，指在 胞膜上生物 的作用下 , 通 胞本身的耗能将物 从膜的低 度一 向 高 度的 运。 主 运 运的物 主要是 离子物 如 ， ， 。特点是需要生物 作用， 消化 胞 自身代 能量，逆 度差 行 。 出胞与入胞， 大分子物 从 胞内移向 胞外称 出胞。 大分子物 从 胞外移向 胞内称 入胞。 出胞与入胞 运的物 大分子物 。 出胞与入胞的特点 需要 胞膜的运 ， 消 耗 胞自身代 能量 。 DNA 复制原理？ DNA 复制基本 律：①复制 程 半保留方式；②原核生物 点起始 , 真核生物多点起 始, 复制方向多 双向 , 也有 向；③复制方式呈多 性 , ( 直 型、 Q 型、 型?等 ) ； ④新 合成需要引物 , 引物 RNA 度—般 几个～ 10 个核苷酸 , 新 合成方向 5’→ 3 ’, 与 模板 反向 , 碱基互 ；⑤复制 半不 的 , 以解决复制 程中 , 两条不同极性的 同 延 伸 , 即?—条 可按 5’→ 3 ’方向 合成称 前 , 另一条 先按 5’→ 3 ’方向 合成 多不 的 崎片段 ( 原核生物一般 1000-2000 个核苷酸 , 真核生物一般 100--200 个核苷酸 ), 再通 接 接成完整 , 称后随 , 且前 与后随 合成速度 不完全—致 , 前者快 , 后者慢 . DNA复制主要包括引 、延伸、 止三个 段 . DNA的复制 是一个 解旋 复制的 程 . 复制开始 ,DNA 分子首先利用 胞提供的能量 , 在 解旋 的作用下 , 把两条螺旋的双 解开 , 个 程叫解旋 . 然后 , 以解开的每一段母 模 板 , 以周 境中的四种脱氧核苷酸 原料 , 按照碱基配 互 配 原 , 在 DNA 聚合 的 作用下 , 各自合成与母 互 的一段子 . 随着解旋 程的 行 , 新合成的子 也不断地延 伸 , 同 , 每条子 与其母 成双螺旋 构 , 从而各形成一个新的 DNA 分子 . , 复制 束后 , 一个 DNA分子 , 通 胞分裂分配到两个子 胞中去 ! 免疫共沉淀与 ChiSeq 原理。 什么是 ChIP? ChIP 的原理很 ： 性富集包含某一特异性抗原的染色体（ ）片段。能 某一蛋白或目的修 蛋白的抗体被用来确定抗原在基因 中一 或多 的相 丰度。 1、分离 染色体 （ ）（需要通 交 使目的抗原固定在染色体 （ ）与其 合的部位） 。 2、将染色体（ ）切割成片段（以提高精度） 。 3、 切成片段的染色体（ ） 行免疫沉淀。 4、免疫沉淀的染色体 （ ）片段 行分析， 确定靶 DNA序列水平与其 入的染色体 （ ） 的相 丰度。 甲 理 胞  ---  收集 胞，超声破碎  --- 加入目的蛋白的抗体，与靶蛋白 -DNA 复合物 相互 合 --- 加入 ProteinA ， 合抗体 - 靶蛋白 -DNA 复合物，并沉淀 --- 沉淀下来的复合 物 行清洗，除去一些非特异性 合 --- 洗脱，得到富集的靶蛋白 -DNA 复合物 --- 解交 ， 纯化富集的 DNA-片段 ---PCR 分析。 简述真核生物 5 ’帽子结构和功能。 m是甲基， m7G指 7- 甲基鸟嘌呤核苷酸 m7G是所有 mRNA的帽子都有结构，它跟 5-PPPN 相连（即 mRNA5端起始三磷酸核苷酸） 。帽子结构通常有三种： m7GPPPN， m7GPPPNm，m7GPPPNmNm。它们分别被称为 O型、 I 型和 II 型 mRNA的加工修饰包括： 5‘端形成帽子结构、 3’端加 polyA 、剪接除去内含子和甲基化。 ①在 5’ - 端加帽 成熟的真核生物 mRNA的 5’ - 端有 m7GPPPN结构，称为甲基鸟苷帽子。 它是在 RNA三磷酸酶， mRNA鸟苷酰转移酶， mRNA（鸟嘌呤 -7 ）甲基转移酶和 mRNA（核苷 - 2’） 甲基转移酶催化形成的。甲基化程度不同可形成 3 种类型的帽子： CAP0 型、 CAP I 型和 CAP 型。鸟苷以