2015版微生物计数培养基适用性验证报告.docxVIP

非无菌产品微生物限度检查用培养基 适用性验证 文件编号： XXXX 起草人 职位 签名 日期 审核人 职位 签名 日期 批准人 职位 签名 日期 文件分发部门 目 录 1. 目的?????????????????????? 1 2. 参照 准?????????????????????? 1 3. 目?????????????????????? 1 4. 工作小 及 ????????????????? 1 5. 材料?????????????????????? 2 6. 程?????????????????????? 3 7. 周期?????????????????????? 4 8. 附件???????????????????????? 4 1、验证目的： 需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数计数用培养基应进行培养基的适应性 检查，本次验证的目的是为了确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂 培养基适合需氧菌总数计数、霉菌和酵母菌总数计数的测定。 2、参照标准：《中国药典》 2015 年版四部 3、验证项目 ：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基适用性验证 验证小组及职责 4.1 验证小组 组 长 姓 名 职务/ 职称 部门 QA部部长 质量部 组 员 姓 名 职务/ 职称 部门 质量控制实验室主任 质量部 微生物化验员 质量部 微生物化验员 质量部 4.2 验证职责 人员 职责 验证组长 负责组织审核验证项目的验证方案、组织项目的具体验证实施、督促 验证小组成员按照方案的要求做好验证记录、起草验证报告、整理验 证档案；当漏项或偏差发生时，负责对其评估并报验证委员会批准； 组织相关的培训。 验证组员 质量控制实验室主任：负责制定确认方案及报告的起草 微生物化验员：负责确认过程的相关检测，确保检验结论正确可靠 试验材料 5.1 验证所用培养基 ： 名 称 胰酪大豆胨琼脂培养基 沙氏葡萄糖琼脂培养基 胰酪大豆胨琼脂对照培养基 沙氏葡萄糖琼脂对照培养基 5.2 验证用菌株培养 验证菌株 代次 金黄色葡萄球菌 CMCC（B）26003 铜绿假单胞菌 CMCC （B）10104 枯草芽孢杆菌 CMCC（B）63501 白色念珠菌 CMCC（F）98001 黑曲霉 CMCC（F）98003 5.2. 仪器设备：  来 源 批 号 培养基 培养温度 培养时间 胰酪大豆胨琼脂培养基30— 35℃ 18— 24 小时 胰酪大豆胨琼脂培养基30— 35℃ 18— 24 小时 胰酪大豆胨琼脂培养基30— 35℃ 18— 24 小时 沙氏葡萄糖琼脂培养基20— 25℃ 2—3 天 沙氏葡萄糖琼脂培养基 20— 25℃ 5-7 天 5.2.1. XXXXX 立式压力蒸汽灭菌器 5.2.2.XXXX 水平流净化工作台 5.2.3.XXXXXX 干燥箱 5.2.4.XXXXX 型霉菌培养箱 (20 ～25℃) 5.2.5. XXXXX 电热恒温培养箱 (30 ～35℃) 5.3. 稀释剂： 0.9%无菌氯化钠溶液 试验过程 6.1 菌液制备 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜 培养物，用 0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液； 取黑曲霉的新鲜培 养物，加入 3-5ml 含 0.05%（ml/ml ）聚山梨酯 80 的 0.9%无菌氯化钠溶液 , 将孢子洗脱，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含 0.05% ml/ml ）聚山梨酯 80 的 0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的黑曲霉孢子悬液。 菌液制备后若在室温下放置， 应在 2 小时内使用； 若保存在 2? 8℃，可在 24 小时内使用。 6.2 、适用性检查 培养基适用性检查 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的菌悬液与黑曲霉的孢子悬液（均不大于 100cfu ），分别注入无菌平皿中，立即倾注适用性检查的胰酪大豆胨琼脂培养基， 用于检查胰酪大豆胨琼脂培养基的需氧菌总数计数适用性。其中，接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的培养皿于 30-35 ℃培养，时间不超过 3 天。接种白色念珠菌与黑曲霉的孢子的培养皿于 30-35 ℃培养，时间不超过 5 天。 取白色念珠菌的菌悬液与黑曲霉的孢子悬液 （均不大于 100cfu ），分别注入无菌平皿中， 立即倾注适用性检查的沙氏葡萄糖琼脂培养基，用于检查沙氏葡萄糖琼脂培养基的霉菌和酵母菌总数计数适用性。培养温度为 20-25 ℃，培养时间不超过 5 天。 上述每一试验菌株平行制备两个平皿， 同时用相应的对照培养基替代被 检培养基进行上述实验。 阴性对照 为确认试验条件符合要求， 同时进行培养基阴性对照试验，阴性对照试 验应无菌生长。 6.3 、结果判定