分子生物学-05-1-第二章染色体与DNA-6转座与调控.docVIP

PAGE 郜刚分子生物学教案 教学单元教案格式 6 第二章 染色体与DNA 课程教案 授课题目：第2章 第6节转座与调控 教学时数： 2 授课类型： eq \o\ac(□,√) 理论课 □ 实践课 教学目的、要求： 理解：不同的调控模式 深入了解：大肠杆菌的复制调控机制 深入掌握：质粒Col 1的复制调控 了解：负调控因子和反义RNA参与的控制复制起始点 教学重点： 重点阐明：大肠杆菌两个复制起始点的调控作用 重点指出：复制的调控是多方面的 教学难点： 绝对难点：质粒Col 1的复制调控 相对难点：真核细胞DNA复制的调控 教学方法和手段： 老师讲授为主：讲授 视频演示 PPT演示 讨论。以电脑幻灯片边演示边讲述为主，（白板课件）辅以板书（黑板板书） 学生回答问题为辅：（如时间等条件许可的情况下） 注：以下内容按实际需要进行取舍 要求有多媒体，因为信息量大，许多结构图需要媒体放映，效果才好 教学内容与教学设计：（第一课时） 2.4.3 复制的调控 许多现象表明，DNA的复制是受到调控的。 比如原核细胞在不同的生长条件下细胞的分裂速度是不同的， 举个例子： 某大肠杆菌细胞在37℃碳源充足的时候，分裂一次需要46分钟；而在碳源不充足的时候，分裂一次需要10个小时，但是在两种情况下，DNA复制的速度都是40分钟左右。 原核生物DNA复制调控的可能机制 1、DNA复制的调控，可能涉及到许多的专一性蛋白质因子和至少一类RNA分子。 2、细胞中蛋白质和DNA总数的比例可能也是一个很重要的因素，因为氨基酸饥俄不但造成蛋白质合成的抑制，而且也造成DNA复制起始的抑制，然而又不知为什么能够允许正在复制中的DNA的复制完毕。 3、从复制原点起始一轮DNA复制，特异性蛋白质因子能否识别和结合原点是关键的一步。 4、在一个细胞周期中，复制原点只能被使用一次，而不是多于一次。比如：SV40复制原点上结合的大T抗原四聚体起初是没有磷酸化的；复制起始以后，大T抗原就被磷酸化从而离开了复制原点。这也同样保证了复制原点的一次性使用。 5、DNA被修饰(如甲基化和去甲基化等)，或者是特异性蛋白质因子被修饰(磷酸化和去磷酸化等)会影响到DNA复制的进行。 例子1：大肠杆菌的复制调控 例子2：质粒Col 1的复制调控 负调控因子Rop蛋白和反义RNA共同控制了复制起始所必须的RNA引物的合成，从而来控制DNA复制的起始 2 真核细胞DNA复制的调控 1、细胞周期水平的调控 又称为限制点调控，即决定细胞停留在分裂期还是中间期，其中许多因素参与：促细胞分裂剂、致癌剂等 在细胞分裂结束后，真核生物细胞核中又一种复制起始必须的因子licensing factor ，它是激活状态的，为下一次复制提供起始信号， 在一次复制完成后，核内的licensing factor失活，同时细胞质中合成新的licensing factor，但是它不能直接进入到细胞核内， 当细胞完成一次分离随着核膜的裂解，licensing factor才有机会与核物质一起进入核，并且是均等的分配到两个子细胞的细胞核中，一旦进入细胞核，licensing factor就会活化，又为下一次复制提供起始信号。 2、染色体水平的复制调控 与染色体是否处于活化状态有关 3、复制子水平的调控 往往通过复制起始点的保守序列 4、细菌(E.coli)DNA每个细胞周期复制一次可能受OriC甲基化的控制 2.6 转座子 （一）基本概念： DNA的转座：由可移位因子介导的遗传物质重排现象。 转座子（transposon）：存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 转座子的类型和结构特征 （二）转座子的类型和结构特征 原核生物转座子的类型： 1、插入序列(insertional sequence,IS) IS是最简单的转座子，不含有任何宿主基因，它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。 2、复合转座子(composite transposon) 复合转座子是一类带有某些抗药性基因（或其他宿主基因）的转座子，其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列 3、TnA家族 复制性转座子 非复制性转座子 作业布置： 1、关于DNA复制中DNA聚合酶的错误说法是 e A 底物是dNTP B 必须有DNA模板 C 合成方向是5’ 3’ D 需要Mg2+参与 E 需要ATP参与 2关于DNA聚合酶I正确的说法是 A 有5’-3’ B 与DNA聚合活性相结合形成切口平移反应 C 可以用于补平缺口 D 是延伸所需要的主要酶 3、DNA复制时，连续合成的链为 先导链 ， 而不连续合成的链为