生物化学课件 10DNA的生物合成.ppt

DNA-pol Ⅳ和DNA-pol Ⅴ 涉及DNA的错误倾向修复（SOS） 缺乏复制准确性 突变频率高 可以克服复制障碍，提高存活率 三、引物酶 ——催化形成RNA引物的RNA聚合酶。 反应不需要3′—OH 需要DNA模板 不同于转录过程的RNA聚合酶 合成方向5′→ 3′ RNA引物一般长几个至十几个核苷酸 原核生物与真核生物复制的比较 1.真核细胞DNA复制有许多起点 2.聚合酶不同于原核生物 DNA合成时两种聚合酶相互协作 3.端粒的复制 线性染色体末端DNA称为端粒，由端粒酶催化其复制过程。端粒酶是一种核酶。 定义:以RNA为模板，按照RNA中的核苷酸顺序合成DNA称为逆转录，由逆转录酶催化进行。 1970年Temin和Baltimore同时分别从劳氏肉瘤病毒和小白鼠白血病病毒等致病RNA病毒中分离出逆转录酶，迄今已知的致癌RNA病毒都含有逆转录酶。 用特异抑制物（放线菌素D）能抑制致癌RNA病毒的复制，而对一般RNA病毒的复制无影响。已知放线菌素D专门抑制以DNA为模板的反应，可见致癌RNA病毒的复制过程必然涉及到DNA。 DNA损伤的修复机制 三、碱基切割修复 参与碱基切割修复的酶和蛋白质 DNA糖基化酶： 能识别并除去异常碱基（如U、I、X），烷基化碱基，嘧啶二聚体等，产生无碱基位点(AP 位点)。 AP内切核酸酶：在AP位点处产生切口。 DNA聚合酶Ⅰ： 切割含AP位点的一段DNA链并填补缺口。 DNA连接酶：连接切口 （1）DNA糖基化酶切除损伤的碱基产生无碱基位点(AP) （2）AP核酸内切酶在无碱基位点处切开产生切口。 （3）DNA聚合酶Ⅰ将含AP的一段DNA链切除并填补缺口。 （4）DNA连接酶连接切口。 碱基切割修复的特点: 1、针对单个碱基缺陷产生的修复方式。 2、DNA糖苷酶具有识别并除去不正常碱基的特异催化活性。 3、不同AP核酸内切酶切割位点不同。 4、需切除含AP位点的一段DNA链后，再修复合成。 DNA损伤的修复机制 四、核苷酸切除修复 参与核苷酸切割修复的酶和蛋白质 ABC切除核酸酶： 整段切除含大损伤(如胸腺嘧啶二聚体)的DNA片段。由uvrA,uvrB,uvrC基因编码。 UvrD解螺旋酶：使损伤的DNA片段除去 DNA聚合酶Ⅰ：填补缺口。 DNA连接酶：连接切口 核苷酸切除修复特点 1.多亚基的依赖ATP的核酸酶进行双切割; 2.在损伤部位的3侧第5个磷酸二酯键切割; 3.在损伤部位的5侧第8(原核)—第24(真核)磷酸二酯键切割; 五、直接修复 参与直接修复的酶和蛋白质： DNA光解酶： 利用光能催化嘧啶二聚体分解成单体。含两个用作光吸收因子或发色团，大肠杆菌是FADH2和FH4 O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶： “自杀性酶”，催化O6-甲基鸟嘌呤上的甲基转移到酶的巯基上。 DNA损伤的修复机制 （四）直接修复（1） 直接修复 六、重组修复与 差错倾向修复 DNA损伤的修复机制 重组修复： 复制时，跳过损伤部位，新链产生缺口由母链弥补，原损伤部位并没有切除,但在后代逐渐稀释。 进行重组修复的DNA损伤常发生在模板链上，由电离辐射和氧化反应等各种因素造成的双链断裂,双链交联或一条单链损伤等。 重组修复 差错倾向修复（ SOS反应） 又叫诱导修复和易错修复 SOS反应：细胞DNA受到严重损伤或DNA复制系统受到抑制的紧急状态下，为求生存而出现的应急反应。 SOS反应包括: 避免差错的修复能力增强 诱导产生无校正功能的DNA聚合酶合成 抑制细胞分裂 SOS反应是生物在不利环境中求得生存的一种基本功能。对原核生物它产生高变异，对高等动物则是致癌的。 第五节 以RNA为模板合成DNA的过程 （逆转录） 新链合成方向：5 ? 3 ? 模板阅读方向：3 ? 5 ? 前导链（领头链）—在DNA复制时，合成方向与复制叉移动方向一致并连续合成的DNA链。 滞后链（随后链）—在DNA复制时，合成方向与复制叉移动的方向相反，不能随复制叉移动方向连续合成的DNA片段。这些复制中的不连续片段被称为冈崎片段。 冈崎片段：真核生物中100-200个核苷酸（核小体的DNA单位）。原核生物中1000-2000个核苷酸（相当于一个顺反子）。 半不连续复制—在DNA复制时，领头链是连续合成的,而随后链的合成是不连续的，这种复制过程称为半不连续复制。 DNA复制的半不连续性 3? 5? 3? 5? 解链方向 3′ 5′ 3′ 3′ 5′ 领头链 随从链 DNA聚合酶Ⅲ在引物的3端 加接脱氧核糖核苷酸。 dATP dGTP dTTP