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形态学分型困难的白血病24例免疫 分型 【摘要】 目的：应用流式细胞仪对24 例临床形态学诊断困难的急慢性白血病进 行快速、有效地免疫分型，以指导临床化疗. 方法：采用单克隆抗体双色直接免疫荧光 标记法及多参数流式细胞术，分型根据抗体 积分系统，并与 FAB分型进行比较.结果： ①9例临床诊断慢性淋巴细胞白血病经 FCM 免疫分型确诊为B淋巴细胞性白血病；② 5 例临床诊断急性淋巴细胞白血病的患者经 FCMfe疫分型确诊1例为B淋巴细胞性白血 病；2例为T淋巴细胞性白血病，且 1例伴 红系异常改变；1例为未分化型白血病；1 例为淋巴细胞白血病 B, T双表达；③5例 急性非淋巴细胞性白血病经 FCMfe疫分型确 诊2例为髓系白血病；3例为红白血病；④1 例MD§半骨髓纤维化经FCMfe疫分型确诊为 M6;⑤4例疑似粒淋双表型白血病经 FCMfe 疫分型确诊为粒淋双表型白血病.免疫分 型与FAB分型的符合率为％.结论：流式细 胞仪多参数白血病免疫表型分析， 可以弥补 FAB分型的不足，为临床诊断提供重要依据， 并为白血病治疗措施的个体化提供依据 . 【关键词】 白血病；免疫分型；流式 细胞仪 0引言 白血病是造血系统的恶性肿瘤，在形态 上变化虽相当大，但仍能表达正常血细胞所 具有的抗原，因而可依据其抗原的表达谱对 白血病进行免疫分型.我们对24例临床确 诊为急慢性白血病，但形态学分型较困难的 患者，应用流式细胞仪对其进行了免疫分型， 并与FAB分型进行了比较. 1材料和方法1材料白血病患者的骨髓 24例，年龄17?67岁.所用单抗包括FITC 标记的 MsIgG1,CD10,CD20,CD3,CD7,HLADR,CD4及 Glycophorin A ;藻红蛋白标记的 MsIgG1,CD19,CD22,CD5,CD33,CD1吸 CD34 均购自美国BD公司.2方法骨髓经肝素抗凝 后，PBS稀释 5 倍，使用 Ficoll(1077 g/L) 分离骨髓单个核细胞，PBS洗涤2次，以 2X 1010/L悬于PBS中，按文献［1］方法进 行标记.以标记FITC的抗钥孔喊血蓝素 mAbIgG2a和标记PE的抗钥孔喊血蓝素 mAbIgGI处理细胞作为阴性对照.应用美国 BD公司的FACSort流式细胞仪进行检测，每 个样本收集 5000?10 000个细胞， Cellquest软件分析其抗原表达情况. 2结果 抗原表达B淋巴细胞性白血病抗原表达 为：CD19,20,22,HLADR; T淋巴细胞性白血 病伴红系异常改变阳性抗原表达为： CD5,CD3, CD7,HLADR Glycophorin A; 髓系 白血病抗原表达为：CD13,CD33;红白血病抗 原表达为：Glycophorin A［% ,CD34 和 CD41 均为阴性；淋巴细胞白血病 B,T双表达阳性 抗原为：CD19,CD10,CD20,CD3,CD13,HLADR; 粒淋双表型白血病抗原表达 为:CD19,CD10,CD20,CD22,CD33,CD13,HLAD R;粒淋双表型白血病抗原表达 为:CD5,CD3,CD33,CD7,CD13,HLADR. 形态学和免疫分型临床诊断慢性淋巴 细胞白血病9例经FCMfe疫分型确诊为 B淋 巴细胞性白血病；临床诊断急性淋巴细胞白 血病的5例经FCMfe疫分型确诊1例为B淋 巴细胞性白血病；2例为T淋巴细胞性白血 病，且1例伴红系异常改变；1例为未分化 型白血病；1例为淋巴细胞白血病 B,T双表 达；急性非淋巴细胞性白血病 5例经FCM兔 疫分型确诊2例为髓系白血病；3例为红白 血病；MDS伴骨髓纤维化1例经FCMfe疫分 型确诊为MQ疑似粒淋双表型白血病 4例经 FCMfe疫分型确诊为粒淋双表型白血病.免 疫分型与FAB分型的符合率为%. 表1流式细胞仪免疫分型 ND+抗原表达量 20%.-:抗原表达量 20%. ND:未测. 表2形态学分型和FCMfe疫分型 3讨论 白血病的主要类型有源自未成熟 T或B 淋巴细胞的ALL,源自未成熟骨髓细胞的 AML 源自成熟B淋巴细胞的CLL,源自粒细胞前 身的CML.准确的诊断可以指导临床选择最 有效的治疗手段.一般认为形态学鉴定细 胞性质准确率在60%而免疫学分型可超过 90%尤其在下列情况下，应用单克隆抗体 对白血病进行免疫分型更为必要.用形态 学、细胞化学染色不能肯定细胞来源的白血 病［2-3 :.如：未分化型白血病和混合细 胞性白血病；形态学为急性淋巴细胞白血病 或急性未分化白血病但缺乏特异性淋巴细 胞系列抗原标记；部分髓系白血病；慢性淋 巴细胞白血病；微小残留白血病 ^ 目前，临床对急慢性白血病的诊断主要 是根据对原始血细胞的形态学与细胞化学 染色的分析来诊断.随着免疫学单抗