补骨脂素的提取分离和鉴定.pdf

. 补骨脂素的提取分离与鉴定 三．实验内容 1 ．称取补骨脂粗粉 50g ，放入 500ml 烧瓶中，加入 50 ％乙醇 200ml ，热回流 1h, 过滤，回收乙醇至无醇味，抽滤，得棕黑色粘 稠物。将棕黑色粘稠物加 80ml 甲醇溶解，加少许活性炭，回流 l0min ，趁热抽滤，滤液回收甲醇，浓缩至小体积，放置析晶，抽 滤， 80 oC 干燥即得补骨脂素粗品，称重，计算提取率。 2 精制 将上述粗品加适量甲醇 (3 ：100 的比例 ) 溶解，加少许活性炭，回流 l0min ，趁热抽 滤，滤液放冷析晶，滤取结晶，少量甲醇淋洗， 80oC 以下干燥即得补骨脂素精品 ③ 。 3 补骨脂素和异补骨脂素的分离 4 鉴定 (1) 异羟肟酸铁反应 取补骨脂素精品少量，置于试管中，加入 7 ％盐酸羟胺甲醇溶 液 2 滴～ 3 滴，再加 10 ％氢氧化钾甲醇溶液 2 滴～ 3 滴，于水浴上加热数 分钟，冷却，用盐酸调至 pH3 ～4 ，加 1 ％三氯化铁试液 1 滴～ 2 滴，观察 溶液颜色。（现象为 30s 后出现红色（阳性反应）） 1 / 2 . (2) 开环闭环试验 取试样少许加稀氢氧化钠溶液 1～2ml ，加热，观察现象，再加 稀盐酸试剂数滴，观察所产生现象。 (3) 荧光 取试样少许溶于氯仿中，用毛细管点于滤纸上，晾干后在紫外灯下观察 荧光。 (4) 薄层色谱鉴定 薄层板：硅胶 G—CMC-Na 板。 点样：补骨脂素精品乙醇液、干柱色谱分得的两样品乙醇 液、补骨脂素对照品乙醇液及异补骨脂素对照品乙醇液。 展开剂：石油醚一乙酸乙酯 (6 ：1) 。 展开方式：上行展开。 显色：在紫外光灯 (365nm) 下观察荧光斑点。 观察记录：记录图谱，计算 Rf 值。 附注：①原料最好用未炮制过的补骨脂种子，其中补骨脂素和异补骨脂素含量较 高。 ②补骨脂含大量油脂，据文献报道，用 50 ％乙醇或 40 ％丙酮提取，方法简便 ,得率 高，亲脂性杂质少，乙醇又较丙酮便宜，故选用 50 ％乙醇提取。利用香豆素内酯类的 特点，用碱提酸沉法，由于补骨脂中含大量油脂和糖类成分，易发生皂化反应和形成 胶状物，难以过滤，得率低。 ③从补骨脂中提取得到的白色针状物，为补骨脂素和异补骨脂素的混合物。 2 / 2