血清脂类测定.pdf

。 血清脂类测定 血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。 目前，对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程，均必须检测血浆（清）中的脂类，通过其含量 的变化，对临床疾患提供协助诊断的依据。有关医学科研工作，脂类的定量检测也是一项必备的研 究项目。 1．胆固醇测定 血浆中胆固醇及其酯的含量检测，从方法学上可分为两大类：一类是化学法包括抽提法和直接 测定法，这类方法目前仍在沿用；另一类是酶法测定，方法敏感特异快速，并能自动化分析，已常 规应用。化学测定法种类多，由于显色反应的特异性不同，其结果有一定的差异。目前公认的参考 方法是 Abell-Kendall(L-B 反应 ) 法。另外，三氯化铁 - 硫酸反应法（ Zak 法）具有显色稳定法、操 作简便、灵敏度约 5 倍于 L-B 反应法，胆固醇酯与游离胆固醇显色程度比较接近等优点，缺点是特 异性差，干扰因素比 L-B 法多，如冰醋酸中含有的乙醛酸，血清样品中的血红蛋白，胆红素以及硫 酸的质量等因素均可影响 Zak 方法的准确性， Zak 法更适合于科研使用。酶法测定血清胆固醇的方 法已被广泛采用， 国产试剂已能满足临床的需要。 胆固醇测定用的标准品， 按美国国家标准局 （NBS） 出品纯度达 99.8%, 是国际公认的参考物， 国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯品， 已 供临床检测血清胆固醇使用。 2．甘油三酯测定 血浆甘油三酯的测定，目前多以化学法和酶法定量。化学法测定甘油三酯是以脂蛋白变性，水 解成甘油，并以甘油为计算依据。酶法是以特异酶水解甘油三酯，除去脂肪酸，再测定甘油，方法 特异，准确而快速，临床广为应用。目前甘油三酯测定的方法主要以定量甘油为依据，然而血清样 品中存在有游离甘油，如何从反应过程中的总甘油中减去游离甘油，多年来一直在研究讨论这一问 题。若不减去，其测定值将会高于血清样品中的真值，如果要减去，就必须先测出血清样品中的游 离甘油，甘油三酯的测定方法将增加一个繁杂的步骤，实际工作中难以做到。有报道血清样品中的 游离甘油实际量是 0.07 ～0.13mmol/L ，相当于甘油三酯的 0.5 ～6.0mmol/L ，为此建议， 实测的甘油 三酯量减去一个校正系数即： 甘油三酯（ mmol/L）=[0.98 ×总甘油（ mmol/L）]-0.07 （mmol/L）。 这一校正系数也仅适用于健康人，对临床病人并不一定适用。据报道，血清样品的游离甘油一 直是个未知数，无法测准。为此，目前临床测定血清甘油三酯时，基本上未考虑游离甘油，因为其 含量很少，暂且忽略不记。 甘油三酯测定的参考物， 推荐三油酸甘油酯和三软脂酸甘油酯混合物 （2： 1，W/W），此参考物适用于化学法。在酶法测定中，仍以高纯度的三油酸甘油酯为参考物。 3．磷脂测定 血清磷脂包括卵磷脂、溶血卵磷脂、神经磷脂、脑磷脂和其他少量磷脂。如需要分别检测各种 磷脂，可以通过薄层层析法、柱层析法和高压液相色谱法。目前，临床仅测定血清磷脂总量。血清 磷脂总量的测定方法有化学方法和酶法两大类。化学法是以磷脂中的磷为定量依据，因为每磷脂分 子中都含有一个磷酸根，故将磷脂的磷称为脂性磷。由于血清中磷脂大部分为卵磷脂，其分子量中 磷约占 4%，故将脂性磷换算成磷脂的系数， 一般为 25。由于化学法均需要抽提， 再测抽提液中的磷 脂的磷，血清中的磷酸盐不可能混入抽提液中，因此血清中的磷酸盐对磷脂测定的干扰很少。酶法 1 2 是利用磷脂酶进行定量测定。 生物体中磷脂酶包括磷脂酶 A 、A 、C 和 D 四种。磷脂酶 D特异性差， 均可水解卵磷脂、溶血卵磷脂和神经磷脂，三者约占血清总磷脂的 95%，临床多用含磷脂酶 d 的试 剂进行磷脂的定量测定。 精选资料，欢迎下载 。 4．游离脂肪酸测定 游离脂肪酸属于未酯化的一类脂肪