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- 2020-11-10 发布于江西
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操 作 标 准
目得:为了使BPG300层析柱装柱过程可重复,并能够得到较好得柱效,故建立此操作规范。
范围:配合?KTA process系统进行有效得蛋白质纯化操作。
责任人:层析工序操作人员
标准操作程序:
1 基本术语概念
填料因子(Packing Factor, PF):指在在装柱过程中,用低流速(如60cm/h)对填料进行沉降压缩得到得调料高度与最后装柱完成时填料高度(柱高)得比值,
GEHC生产得各种常见填料得PF参见《GEHC AxiChrom 300-1000 columns User Manual 28-9562—89 Edition AA》;
线性流速(linear flow rate):单位时间内液体流经得直线距离,常用cm/h表示;
体积流速(volume flow rate):单位时间内液体流经得空间容积,常用ml/min表示;
换算:
2 准备工作
2.1 检查层析柱得完整性,所带配件,就是否水平(用水平仪矫正),就是否清洁(如有污染应进行清洗)、
2、2 确定所用填料及其特性、浓度等
以DEAE Sepharose Fast Flow填料为例,其填料因子(PF)为1.15,新填料(slurry)浓度为75%(保存于20%乙醇中),耐压3bar。
2。3 确定放大后得工艺参数
以XX生化制药股份有限公司得放大工艺为例,
中试工艺参数:
柱高h=10
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