无定形磷酸钙负载rhBMP2纳米缓释体制备及细胞毒性实验.docxVIP

无定形磷酸钙负载rhBMP2纳米缓释 体制备及细胞毒性实验 【摘要】制备无定形磷酸钙负载重组人 骨形态发生蛋白 2纳米缓释体并观察其细 胞毒性，为进一步体内植入提供实验依据。 ［方法］采用湿化学法合成 rhBMP 2/acp 纳米缓释体；兔间充质干细胞与 rhBMP 2 /ACPI内米缓释体进行体外复合培养，观察 细胞在材料表面的黏附、增殖及功能表达， 检测材料的细胞毒性。［结果］材料浸提液 对兔BMSC勺生长无影响，其细胞相对增殖 率在100 2%?102 5%之间，细胞毒性评 级为0级；BMSCsf复合材料表面的黏附、 生长速度、形态与对照组无明显差别。 ［结 论:rhBMP 2/ACN内米缓释体无细胞毒性， 复合培养不影响BMSCS勺正常生理功能，细 胞相容性良好。 【关键词】重组人骨形态发生蛋白-2无 定形硫酸钙细胞培养骨髓间充质干细胞细 胞毒性 Abstract: [ Objective I Todeveloptherecombinanthumanbonemorph ogeneticprotein 21oadedamorphouscalc iumphosphatedelayedreleasenano sized material , investigateitscytotoxicityofcell , andprovideareferencefortheexperimento fcompositematerialinvivo . [ Method] TherhBMP 2/ ACPde1ayedre1eas enano sizedmaterialw erepreparedbychemicalwetmethodandcult uredonrabbitbonemarrow derivedmesenc hymalstemcellsinvitro . Thentheadhesion , proliferation , growthandfunctionalexpressionofBMSCsw eremeasured . [ Result [ CytotoxicitytestdemonstratedthatrhBMP 2/ ACPde1ayedre1eas enano sizedmaterialh adnotaffectthepercentageofcell sprol iferationwithmaterial extractedliqui dculturedwithBMSCsandthecytotoxicityw asgradedzero . Theadhesion , proliferation , configurationofthecellsonthesurfaceof thismaterialwereidenticaltothecontrol group , [Conclusion [ ItwassuggestedthatrhBMP 2 / ACPde 1 ay edr e 1 eas enano sizedmaterialni ighthavegoodcellularbiocompatibility, nocytotoxicityandnoteffectedthenormal functionalexpressionofBMSCsinvitro Keywords:rhBMP 2； amorphouscalciumphosphate ; cellculture BMSCs cytotoxicity 目前，骨修复替代材料的研究在生物取 材、细胞的体外培养、支架材料复合体等诸 多方面积聚了丰厚的基础。无定形磷酸钙是 在采用湿化学法合成羟基磷灰石时发现一 种磷酸钙的无定形中间相， 是一类X射线衍 射为非晶态的磷酸钙材料的总称， 具有典型 的无定形物质的球形面貌。研究发现ACP的 骨传导及细胞黏附性能优于 HA〔 1〕，生物降 解速率高于磷酸三钙〔2〕，可降解可任意塑 形，其化学组分、磷酸钙颗粒的表面形态、 表面亲水性等，能满足药物分子和人体细胞 对载体的多重要求〔3〕，但ACP不具备诱导 成骨能力、降解速率不易控制等缺点。作者 采用AC洵裹重组人骨形态发生蛋白 2, 通过湿化学法合成技术，制备出 rhBMP 2 /ACP：内米缓释体，以期发挥单一材料的原 本优势，克服acp的劣势和rhBMP 2易被 体液稀释及蛋白酶分解不能充分发挥成骨 诱导活性等不足，进一步提高材料的综合性 能。本研究在rhBMP 2/ACPfi米缓释体研 制等前期实验的基础上，观察兔骨髓间充质 干细胞在材料表面的黏附、增殖及功能表达， 评价其细胞毒性。 1材料和方法 1 1 rhBMP 2/ACPI内米缓释体的制备 在ACP原研技术条件下〔4〕，取适