SOP-QA-042701 Nα-叔丁氧羰酰-L-天门冬酰胺检验操作规程.docVIP

页码： PAGE 1/4 编号：SOP-QA-042701 生效日期： 年 月 日 标准操作规程 STANDARD OPERATING PROCEDURE 题 目　　Nα-叔丁氧羰酰-L-天门冬酰胺 检验操作规程 Subject 颁发部门 质量保证部 Issue Department 起 草 日 期 年 月 日 Written by Date 审 核 日 期 年 月 日 Examined by Date 批 准 日 期 年 月 日 Approved by Date 分 发　　质量保证部、中心化验室、档案室 Receiver 1 目的：建立Nα-叔丁氧羰酰-L-天门冬酰胺检验操作规程，以保证Nα-叔丁氧羰酰-L-天门冬酰胺检验结果的准确性。 2 范围：适用于Nα-叔丁氧羰酰-L-天门冬酰胺检验的全部行为。 3 责任：中心化验室对本SOP的实施全面负责。 4 内容： 4．1性状 肉眼观察样品，应为白色或类白色粉末。 4．2比旋度 精密称定本品，加DMF溶解使成约20mg/ml后按“旋光度测定标准操作规程”进行测定。 4．3水分 精密称取样品适量，按“水分测定标准操作规程”进行测定。 4．4纯度 4．4．1实验材料与用具 4．4．1．1高效液相色谱系统 4．4．1．2 C18色谱柱 4．4．1．3抽滤装置 4．4．1．4天平 精度0.01mg 4．4．1．5实验用具：烧杯、量筒、容量瓶、玻璃棒、试剂瓶、微孔滤膜（0.45μm）、一次性滤器（0.22μm） 4．4．2试剂与溶液配制 试剂均需分析纯或色谱纯以上。 4．4．2．1 0.05M TEAP（pH2.3）缓冲液 取磷酸约4ml与三乙胺约7ml，加50%甲醇稀释至1000ml，用磷酸调节pH值至2.3，抽气过滤即得。 4．4．2．2 CH3CN 4．4．2．3供试溶液：取样品适量，加TEAP缓冲液溶解并定量稀释制成每1ml中约含5.0mg的溶液，用0.22μm滤器滤过后，作为供试溶液。 4．4．3操作法 色谱条件 用十八烷基硅键合硅胶为填充剂；以0.05M TEAP（pH2.3）缓冲液为流动相A，以0.05M TEAP（pH2.3）缓冲液-乙腈(30:70)为流动相B，采用梯度洗脱，在30分钟内流动相B由50%增加到100%，并在31分钟时降为50%，用50% B平衡7分钟，检测波长为210nm。 4．4．3．1色谱分离单元的操作 4．4．3．1．1溶剂脱气 先打开氦气瓶气体阀门，将分压表调至0.5MPa；按“Menu/Status”键，进入“Status(1)”界面，用“↑”、“↓”、“←”、“→”键在界面上 “Sparge”项中，选择A、B、C或D中所选用的溶剂流路号进行脱气处理（如选用A、B两瓶溶剂，则选择A-100%，B-100%，按“Enter”键开始脱气），脱气15～20分钟后，可将脱气量由100%降为30%。 4．4．3．1．2干灌注 如长时间未用机器溶剂管理系统流路是干的或系统中有空气存在时，需先做抽气灌注处理。 4．4．3．1．2．1轻轻振荡溶剂瓶中的过滤头以除去可能存留的气泡； 4．4．3．1．2．2打开溶剂输送单元进入门，在灌注排液阀出口插上一支注射器，然后打开排液阀（逆时针旋转半圈），不要将注射