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31 32 发酵罐设计原则 ? 1 发酵罐应能在无菌条件下工作数天， 且应在长时间运转过程中保持稳定 ? 2 通气和充分搅拌，以满足微生物代谢 的需要 ? 3 尽可能低的功率消耗 ? 4 发酵罐上应配备有温度和 pH 值控制系 统以及采样装置 33 ? 5 发酵罐内的蒸发损失不应太多 ? 6 在放料、清洗和维修等操作过程中具有最低 的劳动力消耗 ? 7 发酵罐应用较好的适应性，以满足不同生产 厂家的需求 ? 8 发酵罐内表面应光滑，而且尽可能的采用焊 接 ? 9 用于中试规模的发酵罐与用于实际生产的发酵 罐应具有相同的几何形状，有利于放大生产 ? 10 使用既能满足工艺要求又比较便宜的制造材 料，同是应配备完善的供给设施 34 设计原则 ? 稳定性 ? 控制性 ? 操作性 ? 安全性 ? 可视性 35 微生物细胞反应器 ? 机械搅拌型微生物细胞生物反应器 （通用型） 主要由壳体、控温部分、搅拌部分、通 气部分、进出料口、测量系统和附属系统组 成。 ? 机械搅拌自吸式反应器 利用搅拌器旋转时产生的抽吸力吸入空 气，不需要空气压缩机提供压缩空气。缺点： 进罐空气处于负压状态，容易增加杂菌侵入 机会。 36 ? 气升式环流反应器 借助设在环流管底部的空气喷嘴将空气以 250~300 米 / 秒的高速喷入环流管，使气泡分散在培养基中。 将主体中由于菌体代谢而溶氧量低的培养液送入环 流管，培养液补充氧气后再送回反应主体，而为菌 体生长提供良好的氧气供应。 ? 高位塔式生物反应器 利用通入培养液的无菌空气泡上升带动液体运动， 产生混合效果的非机械搅拌式生物反应器，适用于 培养液黏度低、固体含量少和需氧量低的发酵培养 过程。 ? 基因工程菌生物反应器 利用 DNA 重组技术将来源不同的基因有目的地组合 在一起，获得具有全新遗传特性的重组微生物细胞， 即基因工程菌，而用于培养基因工程菌的生物反应 器称为基因工程生物反应器。 37 动物细胞培养生物反应器 动物细胞有悬浮培养、贴壁培养、包埋培养等 多种培养方式，所在生物反应器的形式和种类也不 相同。 ? 气升式细胞培养生物反应器 将气体混合物从罐底部的喷射管喷入反应器的 中央导流管，使中央导流管内的液体密度低于外部 区域液体的密度，形成循环。 ? 中空纤维管生物反应器 既可以培养悬浮细胞，又可以培养贴壁细胞， 主要用于杂交瘤和生产单克隆抗体。 38 ? 通气搅拌生物反应器 （ 1 ）笼式通气搅拌生物反应器 避免通气时气泡直接损伤细胞。它借助一 个多孔的通气装置在笼内通气。缺点：气 路不能在线灭菌。 （ 2 ）双层笼式通气搅拌生物反应器 使气路能在线灭菌，并采用具有静止密封 的磁力驱动装置，将单层改为双层，扩大 了丝网交换面积，使氧传递系数增大。 39 ? 流化床生物反应器 通过垂直向上循环流动，培养液不断供给 细胞必要的营养成分，使细胞得以在微粒 中生长。同时不断加入新的培养液，排出 培养产物和代谢产物。 ? 无泡沫搅拌生物反应器 属于一种配备有膜搅拌器的生物反应器， 它将一个多孔的疏水塑料管装配成通气搅 拌桨，具有良好的氧通透性。 40 植物细胞培养反应器 ? 机械搅拌生物反应器 能获得较高的溶氧系数，已成功应用于许多植物 细胞的培养。 ? 气体搅拌生物反应器 不采用搅拌装置，避免细胞损伤，容易保持无菌 状态 ? 填充床生物反应器 细胞位于支撑物表面，也可以包埋于支撑物中。 培养液流经支撑物颗粒，不断被细胞利用。 41 ? 流化床生物反应器 利用流体的能量来悬浮颗粒，达到固定化 培养细胞的目的。通常采用小固定化颗粒。 缺点是剪切力和颗粒的碰撞会损坏固定化 细胞。 ? 膜生物反应器 主要采用中空纤维和螺线式卷绕反应器。 优点是可以重复使用。 42 发酵工程的基本工艺 微生物发酵动力学 ? 分批培养 ? 连续培养 ? 补料分批培养 43 ? 机械搅拌式发酵罐是 利用机械搅拌器的作 用，使空气和发酵液 充分混合，促使氧在 发酵液中溶解，以保 证供给微生物生长繁 殖、发酵所需要的氧 气。 机械搅拌式发酵罐的结构示意图 机械搅拌式发酵罐的实物图 44 分批培养 ? 又称分批发酵，是指在一个密闭系统内投入有限数量的 营养物质后，接入少量的微生物菌种进行培养，使微生 物在特定条件下只完成一个生长繁殖周期的培养方法。 ? 1942 年， Monod 方程 ? 温度、 pH 值、营养物质类型和营养物浓度等条件一定 时，微生物细胞的比生长速度与限制性营养物质的浓度 之间存在一定的关系，即： ? ? m ：微生物的最大比生长速度 ? S ：限制性营养物质的浓度 ? Ks ：饱和常数，当 ? =1/2 ? m 时的 S 的 浓度 45 ? Ks 的大小反映了微生物对营养物质的吸收 亲和力大小， K