2021年选修三知识点填空答案.docVIP

选修3《现代生物科技专题》 专题1 ? 基因工程 基因工程概念 基因工程是指根据大家愿望（定向变异），进行严格设计，经过 体外 （体内、体外）DNA重组和转基因技术，给予生物以新遗传特征，发明出更符合大家需要新生物 类型 和生物 产品 。基因工程是在 分子 水平上进行设计和施工，又叫做 DNA重组 技术 。 基因工程技术原理： 基因重组 基因工程优点：（1）目标性强，能够定向改变生物品质。（2）克服远缘杂交不亲和。 1.1 基因工程基础工具 1.“ 分子手术刀 ”——限制酶（全称：限制性核酸内切酶） （1）关键起源： 原核生物 。 （2）功效：能够识别双链DNA分子某种 特定 核苷酸序列（被识别序列具反向对称特点），而且使每一条链中 特定 部位两个核苷酸之间 磷酸二酯键 断开，所以含有专一性。 （3）结果：经限制酶切割产生DNA片段末端通常有两种形式： 黏性 末端和 平 末端。 （4）和解旋酶区分： 解旋酶：断开碱基对间 氢键 限制酶：断开两个脱氧核苷酸之间（即磷酸和脱氧核糖之间） 磷酸二酯键 2.“ 分子缝合针 ”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶（E·coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶）比较： ①相同点：全部连接 磷酸二酯 键。 ②区分：E·coliDNA连接酶起源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补黏性末端之间磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端之间效率较低。 和DNA聚合酶作用异同: DNA聚合酶：只能将单个核苷酸加到已经有核苷酸片段末端，形成磷酸二酯键。 DNA连接酶：连接两个DNA片段末端，形成磷酸二酯键。 3.“ 分子运输车 ”——运载体 （1）运载体含有条件：①含有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ②能在受体细胞中复制并稳定保留。 ③含有标识基因，供重组DNA判定和选择。 ④能在受体细胞中稳定保留（对受体细胞无害），大小适宜。 （2）最常见载体是 质粒 ,它是一个裸露、结构简单、独立于细菌染色体之外，并含有自我复制能力很小双链 环状 DNA分子。 （3）其它载体： λ噬菌体衍生物 、 动植物病毒 。 （4）在进行基因工程操作中，真正被用作载体质粒，全部是在天然质粒基础上进行过人工改造。 1.2基因工程基础操作程序 步骤：1、 获取目标基因 ， 2、 基因表示载体构建 ， 3、 将目标基因导入受体细胞 ， 4、 目标基因检测和判定 。 第一步：获取目标基因 1.目标基因范围：编码蛋白质基因、含有调控作用因子。 2.目标基因起源：自然界取得或人工合成 自然界取得：采取直接分离法---用合适限制酶处理得到。工作量大，多为原核基因起源。 人工合成： 反转录法 和化学合成法。操作复杂，基因结构不完整，多为真核基因起源。 补：基因结构 原核基因、真核基因全部有两种区域： 编码区 、 非编码 。但真核基因前者是不连续，分为 外显子 和 内含子 。 3.目标基因（大量）获取方法 （1）从基因文库获取 A.基因文库分类：基因组文库、 部分基因文库 B.获取方法：据 目标基因 相关信息，和基因表示产物蛋白质等特征。 C.两种文库中目标基因起源： 基因组文库目标基因起源于 自然界直接分离法取得 。 cDNA文库目标基因起源于 反转录法人工合成 。 D.两种文库中目标基因区分：书P10表格 （2）PCR( 多聚酶链式反应 缩写)技术.(发明人：穆里斯等人) A.原理： DNA双链复制 B.特点： 体外 复制， 指数 增加， 需要 （需要、不需要）模板。 C.过程： 第一步：高温解链（变性）：加热至90～95℃，双链DNA受热解成单链（不需解旋酶）； 第二步：低温引物（复性）：冷却到55～60℃，引物和模板单链DNA互补结合； 第三步：中温复制（延伸）：加热至70～75℃，热稳定 DNA聚合酶从引物起始互补链合成。 第四步：反复一至三步。 D.所需条件：模板为 目标基因 ，原料为 四种脱氧核苷酸 ，酶为 热稳定DNA聚合酶 ，能量由 ATP 直接提供。 （3）化学合成法人工合成（经过DNA合成仪） 特点：A. 基因较小 B. 核苷酸序列已知 C. 不需模板 第二步：基因表示载体构建