针刺通过TRP通道对离心运动性骨骼肌损伤后α7β1整合素活性的影响.pdfVIP

摘要 摘 要 1 研究目的 观察一次急性离心运动后大鼠骨骼肌α7 integrin、β1 integrin、总FAK 和磷酸化p-FAK397 的蛋白表达变化以及骨骼肌细胞外基质胶原面积变化和肌内膜分布变化，分析 α7β1 整合 素对骨骼肌细胞外基质基底膜重塑的信号通路，揭示针刺效应对离心运动性骨骼肌损伤的 治疗机理。 2 研究方法 72 只健康雄性Wistar 大鼠被随机分为安静组（C ）、运动组（E ）、运动针刺组（EA ） 和运动针刺阻断剂组（EAI ）。除C 组外其他各组别均进行90 min 离心运动训练：跑台坡 -1 度-16°，速度16 m·min ，每组5 min，共18 组，组间休息2 min 。针刺处理方案：①E 组 运动结束后不施加任何恢复措施。②EA 组于运动结束40 min 后针刺一次大鼠股中肌，观 察一次针刺效应。③EAI 组运动后即刻，大鼠腹腔注射含2% GdCl3 （Ca2+通道阻断剂）的 生理盐水溶液（40 μM·kg-1 ），于40 min 后针刺，针刺处理同EA 组，观察一次阻断效应。 各组大鼠分别于离心运动后1 h 、48 h 和120 h 取股肌。采用Western blot 测试α7 integrin、 β1 integrin、总FAK 和磷酸化p-FAK397 蛋白表达变化，透射电镜观察骨骼肌细胞外基质胶 原面积变化，扫描电镜观察骨骼肌细胞外基质肌内膜分布变化。 3 研究结果 3.1 骨骼肌 α7 integrin 和 β1 integrin 蛋白表达变化：①α7 integrin ：全长α7 integrin （120 kDa ）和裂解α7 integrin （70 kDa ）于各组别和各时相的蛋白表达水平均与安静组保持一致， 无显著性变化。②β1 integrin ：与C 组相比，E 组β1 integrin 表达于48h 达到峰值，呈显著 性差异（P0.05 ），EA 组β1 integrin 表达分别于1 h 和48 h 呈极显著性增加（P0.001）和 显著性增加（P0.05 ），于1 h 达到峰值，与E 组相比呈极显著性增加（P0.001），针刺提 前了β1 integrin 的蛋白表达。 3.2 骨骼肌磷酸化p-FAK397 和总FAK 蛋白表达变化：①磷酸化p-FAK397 ：与C 组相比，E 组、EA 组和EAI 组中p-FAK397 的表达均低于C 组，呈显著性降低（P0.05 ）；E 组p-FAK397 的表达呈先上升后下降趋势；EA 组p-FAK397 的表达于1 h 达到峰值，与E 组呈显著性增 加（P0.05 ）；与EA 组相比，EAI 组p-FAK397 表达于 1 h 、48 h 呈显著性减少（P0.05， P0.05 ），针刺提前激活了FAK 的活性。②总FAK ：总FAK 于各组别和各时相的表达水平 均与安静组保持一致，均无显著性变化。 3.3 骨骼肌细胞外基质胶原面积变化：与C 组相比，E 组胶原纤维数量和胶原面积增大， 48 h 达到峰值，EA 组抑制了胶原增生，呈先上升后下降趋势。与E 组相比，EA 组胶原面 积于1 h 和48 h 呈极显著性降低（P0.001）；与EAI 组相比，EA 组胶原面积于48 h 到达 I 摘要 峰值，呈非常显著性增加 （P0.0 1），于120 h 呈非常显著性降低（P0.0 1）。 3.4 骨骼肌细胞外基质肌内膜分布变化：C 组骨骼肌肌内膜网络交联均匀完整，错落有致； 120 h E 组骨骼肌肌内膜损伤未完全恢复，部分肌内膜网络存在大的胶原纤维交联空缺； 120 h EA 组骨骼肌肌内膜损伤减轻，存在较小的胶原纤维交联空缺；120 h EAI 组骨骼肌 肌内膜损伤明显，胶原纤维交联空缺较为严重。 4 结论 4. 1 急性离心运动引抑制了骨骼肌α7β1 整合素的活性。 4.2 针刺通过TRP 通道调控了骨骼肌α7β1 整合素的表达和活性，促进了骨骼肌损伤修复和 细胞外基质的重塑。 关键词：离心运动；针刺；α7β1 整合素；黏着斑激酶；细胞外基质