鸡胚多肽调节免疫力功能的初步探究.pdfVIP

摘 要 免疫力低下是现代社会中人们普遍存在的一种亚健康状态，人体在此状态下易受病原菌入 侵，使机体受到损害。免疫应答作为重要的人体保护屏障，与人体的健康有着直接的关系，免疫 力强弱对于人体健康具有非常重要的意义。通过研究具有免疫调节肽的天然食物，筛选出其中的 功能性物质，可制成保健品或营养品来提高人体免疫力。鸡胚蛋作为一种民间药膳补品，因营养 丰富，口感滑嫩等优点，有长久的被食用历史。研究报道表明，鸡胚蛋匀浆物、鸡胚蛋水溶物、 鸡胚蛋脂溶物，均对调节免疫力起促进作用。本文以鸡胚蛋为原料，通过蛋白质提取、优化水解 工艺、鸡胚多肽分离获得不同分子量大小的鸡胚多肽，探究其对于免疫力的增强和调节作用。 本文以13 日龄的鸡胚蛋为原料，提取蛋白后获得鸡胚粗蛋白，通过单因素和响应面实验探 究枯草杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶在内的五种蛋白酶的酶解 效果，优化菠萝蛋白酶水解鸡胚的酶解工艺，其中水解度最高的组合为在pH 为6、酶与底物比3 %、 酶解温度45℃ 的条件下，使用菠萝蛋白酶酶解鸡胚，酶解时间为7 h 。 在优化鸡胚蛋酶解工艺的基础上，以最优工艺条件酶解鸡胚蛋后获得鸡胚多肽，利用超滤和 透析技术，获得分子量为小于 1 kDa、1-5 kDa、5-10 kDa、大于10 kDa 的四组鸡胚多肽。调节四 个组分的浓度，给予小鼠巨噬细胞，空白对照组给予完全培养基，与对照组实验相比，不同浓度 的四组鸡胚多肽在细胞增殖和中性红吞噬的实验中，均促进小鼠巨噬细胞增殖并增强巨噬细胞吞 噬活性。 将小鼠巨噬细胞RAW264.7 分为三组，分别给予完全培养基、脂多糖（LPS ）、脂多糖和不同 浓度鸡胚多肽。LPS 可抑制细胞免疫功能，促进巨噬细胞NO 的释放，及NF-κB 、Toll-like Receptors 免疫通路中相关免疫因子（iNOS 、IL-6 、IL-10 、TNF- α、TLR4 ）的基因表达。给予鸡胚多肽刺 激巨噬细胞的实验组与脂多糖刺激的实验组比较，巨噬细胞NO 的释放量、iNOS mRNA 、IL-6 mRNA 、IL-10 mRNA 、TNF- αmRNA 、TLR4 mRNA 的基因表达回调，说明鸡胚多肽对于增强 免疫力起促进作用。 关键词：鸡胚蛋，肽，响应面分析，免疫调节 I Abstract Low immunity is a sub-health state that is common in modern society. In this state, the human body is susceptible to invasion by pathogenic bacteria. The immune response, an important protective barrier, has a direct relationship with the health of the human body, and the strength of the immune system is very important for human health. Functional substances screening out from natural foods with immunomodulatory peptides can be made into health products or nutritional products to improve human immunity. Chicken embryo eggs, as a folk medicinal dietary supplement, have a long history of being eaten due to their rich nutrition and smooth and tender taste. Research reports have shown that chicken embryo egg homogenate, chicken embryo egg water solubles, and chicken embryo egg