高大山羊草1S~1x2.3_及1S~1y16_和小麦1Dy12亚基面粉加工品质效应分析.pdfVIP

高大山羊草1S~1x2.3_及1S~1y16_和小麦1Dy12亚基面粉加工品质效应分析.pdf

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摘 要 小麦籽粒高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS )和低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS )的含量和组 成影响着面粉加工品质。高大山羊草是重要的小麦近缘种属,蕴含着优质麦谷蛋白亚基,是改良 l l 小麦加工品质的潜在遗传资源。本研究拟用小麦-高大山羊草易位系1S L/1BS 和1S S/1BL 分别与 宁春4 号等小麦品种杂交,连续回交并结合分子标记辅助选择,获得农艺性状优良的小麦-高大山 l 羊草新易位系。同时,对转高大山羊草1S x2.3*基因小麦材料进行分子标记、SDS和FISH 鉴定,获得纯合转基因株系。另外,对 1Dy 12 缺失突变体进行 SDS鉴定和纯合。最后, 对这些材料品质相关基因表达、蛋白体动态变化和面粉加工品质进行分析,解析不同麦谷蛋白亚 基的品质效应和作用机制,促进小麦加工品质改良。主要研究结果如下: l l 1、 回交转育结合分子标记辅助选择将小麦-高大山羊草易位染色体1SL/1BS 和1S S/1BL 转 移到小麦品种宁春4 号、宁春50 号和Westonia 的遗传背景中,获得10 个农艺性状优良的纯合新 l l l 易位系。对BC F 代1S L/1BS 和1S S/1BL 纯合新易位系面粉进行的加工品质分析表明,1SL/1BS 3 4 l 易位系的面团和面筋强度小于非易位背景对照材料,1S S/1BL 易位系的面包体积和面包感官评分 大于相应遗传背景的轮回亲本。 l 2 、 利用农杆菌介导法将 1S x2.3*基因转入了 Westonia 中,通过 Bar 试纸条、分子标记、 l SDS和荧光原位杂交(FISH )等检测,获得了2 个转1S x2.3*基因的纯合株系。通过对纯 l 合株系T-W1 中的HMW-GS 基因(1S x2.3* 、1Ax2*、1Bx17、1By18、1Dx2 和1Dy12)和品质相 关基因 (PDI-1、PDI-4、PDI-5、Bip-1、Bip-2、Bip-3、DOF-2、DOF-3、DOF-6、SPA-A 、SPA-B l l 和SPA-D )在籽粒灌浆阶段的表达进行qRT-PCR 分析,发现转1S x2.3*株系中1S x2.3* 正常表达, 且显著刺激了1Dx2 和1Dy12 的表达,籽粒发育大部分阶段1Ax2*和1Bx17 表达高于对照,但1By18 表达在籽粒发育整个阶段显著低于对照;PDI4-1、PDI5-1、Bip-2、Bip-3、SPA-A 和 SPA-D 在转 基因株系灌浆阶段的表达水平显著下调,而Dof-3、Dof-6 和SPA-B 在在转基因株系灌浆阶段的表 l 达水平显著上调。最后,通过对转 1S x2.3*基因纯合株系 T-W1

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