植物蛋白替代鱼粉对施氏鲟瓣肠及肠肝胆汁酸循环的影响.pdfVIP

摘 要 随着优质蛋白源鱼粉资源日益匮乏，植物蛋白已成为替代蛋白源研究的热点。施氏鲟野生资 源濒危，同时是我国重要的经济鱼类，目前市场上还没有针对施氏鲟的饲料产品，植物蛋白对施 氏鲟生长的影响也鲜有报道。因此，本文系统报道了植物蛋白饲料对施氏鲟生长性能，瓣肠及肠 肝胆汁酸循环的影响及其机制。 用混合植物蛋白 （大豆浓缩蛋白和棉籽浓缩蛋白）分别替代对照组(含54%鱼粉)饲料中50 ％ 和100％的鱼粉，3 组饲料等氮等能，分别命名为P0、P50 和P100 。施氏鲟初始体重为87.48 ±0.02g ， 每个处理组设4 个重复，进行为期8 周的养殖实验。虽然必须氨基酸，脂肪酸和有效磷已经根据 鲟鱼的营养需求进行了平衡，但全植物蛋白饲料显著降低施氏鲟存活率(SR)、增重率(WGR)和蛋 白质沉积率 （PPV ）（P 0.05 ），并且引起瓣肠严重氧化损伤。P50 组和P100 组瓣肠微生物多样 性显著降低 （P 0.05 ），潜在病原菌Clostridium_sensu_stricto_1 属显著增加 （P 0.05 ），而与胆 汁酸代谢相关的益生菌 Turicibacter 属显著减少 （P 0.05 ）。Plesiomonas 属中强致病菌 Plesiomonas_shigelloides 在P 100 组中显著增加 （P 0.05 ）。 施氏鲟摄食全植物蛋白饲料，瓣肠活性氧(ROS)显著增加 （P 0.05 ），粘液层和紧密连接 （Occludin 和ZOs）被破坏，粘膜褶皱变短。并且瓣肠抗氧化（Keap1 ，Cu / Zn-SOD，CAT，GST1 和GST3 ），自噬（ATG7 、ATG16 和LC3B-II / I ），增殖（CyclinD1 和CyclinE ），程序性凋亡（caspase3 ， caspase8 和caspase9 ），细胞因子 （IL-1β 和IL10 ）和ERK 1 磷酸化 （P 0.05 ）被抑制。结果表明， 饲料中植物蛋白含量低于27 ％不会影响施氏鲟的生长性能，而全植物蛋白饲料会引起施氏鲟瓣肠 氧化应激和黏膜损伤，从而通过抑制ERK1 的磷酸化抑制瓣肠抗氧化，凋亡和自噬，进而导致免 疫力低下并且自我修复能力降低，最终导致施氏鲟生长性能降低甚至死亡。 随着施氏鲟肠道菌群改变及瓣肠损伤，导致胆汁酸重吸收障碍，P100 组瓣肠胆汁酸显著降低 （P 0.05 ），瓣肠胆汁酸代谢调节核受体FXR 和膜受体TGR5 显著下调 （P 0.05 ）。虽然P100 组胆固醇合成关键酶HMGCR 显著上调（P 0.05 ），而各组胆固醇含量并没有明显差异（P 0.05 ）， 但核受体FXR 显著下调（P 0.05 ），胆汁酸合成关键酶CYP7A1 和CYP8B1 显著上调（P 0.05 ）， 并且胆汁酸含量显著增加 （P 0.05 ）。胆汁酸淤积导致肝脏ROS 显著增加 （P 0.05 ），免疫细胞 因子 （TGFβ1 和IL10 ）和凋亡 （caspase9 和caspase3 ）被抑制 （P 0.05 ），并且随着P100 组中 施氏鲟肝脂含量显著增加 （P 0.05 ）脂肪肝和纤维化病变增多。结果表明，高水平植物蛋白饲 料破坏施氏鲟肠道菌群，抑制瓣肠胆汁酸重吸收，肝脏胆汁酸淤积，引发肝脏氧化应激和免疫抑 制。 关键词：植物蛋白，施氏鲟，瓣肠，肝脏，胆汁酸肠肝循环 I Abstract Plant protein (PP) has become the focus of research on alternative protein sources with increasing shortage of fishmeal production. Amur sturgeon is the oldest cartilaginous scalefish with important biological value, and it is also an important economic fish in China, but there is