功能荧光探针用于硝基呋喃类药物和硒代半胱氨酸的检测.pdfVIP

摘要 摘要 高效液相色谱（HPLC ）方法已经广泛的应用于食品安全，环境监测以及医学等领域。 但是，由于一些待测物质的含量比较低以及其组分的复杂性，HPLC 的应用受到了一定的 限制。化学衍生法的发展能够大大提高检测物的灵敏度。荧光标记试剂的发展使得 HPLC 方法用于痕量组分的检测成为可能。因此，开发新型的荧光标记试剂并将其与高效液相色 谱联用检测痕量物质具有重要的研究意义。硝基呋喃类药物因其具有一定的致癌性和致畸 性，因此被限制使用。因此，在食品中检测其滥用是必要的。 生物体内的一些内源性活性物质（如小分子和离子），在生命体内的种类和浓度不尽相 同，生理功能各异。详尽的了解相关活性物质的产生、分布以及其生理功能对研究生态平 衡、生理和病理过程有着十分重要的意义。因此，实时动态的监测这些活性物质是必要的， 荧光成像的发展恰恰满足了此类的需求。此外，小分子荧光探针技术的发展为疾病的早期 诊断提供了一定的可能。 本文主要利用两种衍生化试剂通过微波辅助衍生伴随着高效液相荧光检测技术对食 品中硝基呋喃类药物进行了定量研究。此外，为了研究硒代半胱氨酸（Sec）的生理和病理 作用，我们设计并合成了一种比率的近红外的荧光探针，并将其用于甲状腺疾病中，并在 细胞和甲状腺小鼠模型中检测Sec 含量的变化。具体工作如下： 第一章：荧光标记试剂在高效液相色谱方法的应用以及小分子荧光探针的发展及其应 用，简要介绍硝基呋喃代谢物的概况及其定量检测方法。 第二章：以7-(二乙氨基)香豆素-3- 甲醛为衍生化试剂，对四种硝基呋喃代谢物进行衍 生化，并通过高效液相色谱-荧光检测（HPLC-FLD ）进行分析。该方法已经成功的应用于 食品中四种硝基呋喃代谢物的定量检测。 第三章：成功设计并合成了荧光衍生化试剂，4- （吖啶酮-10-基）苯甲醛，并结合HPLC- FLD 方法成功的应用于虾试样中硝基呋喃代谢物的检测。借助微波辅助技术以及响应面曲 线法，对衍生化条件进行优化，使得反应时间大大缩短。在最优化的条件下，成功实现了 虾试样中四种硝基呋喃代谢物的定量检测。 第四章：成功设计并合成了一种用于检测甲状腺疾病中Sec 含量的变化的小分子荧光 探针。同时，使用一个双氧水探针测定在甲状腺疾病细胞和小鼠中双氧水含量的变化。此 外，评价了Sec 在甲状腺疾病模型中的抗炎和抗氧化作用。 关键词：高效液相色谱；衍生化；荧光探针；硝基呋喃代谢物；硒代半胱氨酸 I Abstract Abstract High-performance liquid chromatography (HPLC) method has been widely used in food safety, environmental monitoring, and medical fields. The development of chemical derivatization methods can greatly improve the detection sensitivity. However, due to the low content of some tested substances and the complexity of their components, the application of HPLC has been limited. The development of fluorescently labeled reagents has made it possible to use HPLC methods for the detection of trace components. Therefore, it is of great research significance to develop a novel type of fluorescent