细胞培养失败常见原因及对策.docxVIP

表：细胞培养失败常见原因及对策 出现问题 可能原因 解决办法 培养基中 pH 错误的 CO2浓度 调节 C02 浓度 快速改变 [NaHC0 ]2-3.7g/L,[C0 2 ]5-10% 2 培养瓶盖子过紧 稍放松盖子 缓冲液量不足 加 HEPES至最终浓度为 10-20mM 细菌、酵母和 丢弃培养物、避免污染 真菌污染 细胞不贴壁 过量的胰酶消化 减少胰酶浓度或消化时间 培养基中无粘附因子 加大血清浓度或增加粘附因子 细菌、霉菌、支原体污染 检查并去除污染或丢弃 物理、化学污染 去除相关污染 细胞生长速度降低 改变培养基或血清 比较培养基中成分 , 新旧血清比较 缺乏促进生长成分 传代培养 , 加新鲜培养基和 如谷氨酰胺或生长因子 生长促进成分 培养基储存不当 保存在 2-8 ℃， 血清培养基应尽量避光 初次细胞接种量少 增加细胞接种数量 细胞衰老 取得新细胞株 低度细菌和真菌污染 无抗生素的培养基 , 如被污 染， 则丢弃 支原体污染 隔离培养 , 如污染 , 丢弃 细胞死亡 无 C02 检测 C02 温度波动 检验温度 抗生素浓度超量有毒性 少量使用抗生素 细胞复苏受损 重新复苏 渗透压错误 检测培养基渗透压 产生毒性代谢物 去除并更换培养基 细胞成团悬浮 Ca，Mg离子存在 2+ 2 用无 Ca ，Mg离子的平衡盐溶 液清洗细胞 支原体污染 隔离培养 , 检验支原体污 染, 如已经污染 , 则丢弃 胰酶过量 , 细胞 DNA释放 用 DNase处理细胞 细胞形态、生长 状况改变 细胞间污染 更换细胞 （注：专业文档是经验性极强的领域，无法思考和涵盖全面，素材和资料部分来自网络，供参考。可复制、编制，期待你的好评与关注）