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基因工程原理一 01244 4 月21日14:30 —17:00 一、名词解释 基因：是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小 功能单位。 基因工程：是指利用重组技术，在体外通过人丁“剪切”和“拼接”等方法， 对各种生物的核酸（基因）进行改造和重新组合，然后导人微生物或真核细胞内 进行无性繁殖，使重组基因在细胞内表达，产生出人类需要的基因产物，或者改 造、创造新的生物类型。 顺反子：基因作为一个遗传功能单位，它所对应的一段核苷酸序列被称为顺反 子。一个顺反子编码一条完整的多肽链，因此，顺反子是一个功能单位。 启动子：是位于基冈5端上游紧靠转录起点的一段非编码序列，其功能是引 导RNA聚合酶与基陶相应部位的正确结合，启动基㈨的转录。 外显子与内含子：被分隔开的编码序列称为外显子，是在基因内编码蛋白质的 DNA片断；在编码序列之间的序列称为内含子，是在基因内不编码蛋白质的 DNA 片断。 6操纵子：原核生物中，功能相关的基因常串联在一起，构成信息区，与其上游 的调控序列共同组成一个转录单位一一操纵子。 增强子：增强子是一段DNA序列，其中含有多个能被反式作用因子识别与结合 的顺式作用元件。反式作州因子与这些元件结合后能够，调控（通常为增强）邻 近基田的转录。 基因组：在特定的细胞或生物体中，一套完整单倍体的遗传物质的总和称为基 因组。 信号肽：约南15 -30个疏水氨基酸残基组成，其特点为疏水性。它的作用是使 蛋白质从内质网膜进入高尔基体。 聚合酶链式反应：是指在引物存在的条件下、 以DNA为模板、南DNA聚合酶催 化的对特定基因或DNA序列进行体外快速扩增的反应，故又称为基因的体外扩增 法。 双链DNA的熔解温度：加热可以打开DNA双链结构，当一半分子为单链而另外 一半分子仍处于双链状态时的温度称为该双链 DNA的熔解温度，即几 核酸分子探针：是指特定的已知核酸片段，能与互补核酸序列邀火杂交，蹦此 可以刚于待测核酸样品巾特定基因顺序的探测。 膜上印迹杂交：是指将待测核酸序列片段结合到一定的固相支持物上， 然后与 存在于液相巾标记的核酸探针进行杂交的过程，也称印迹技术（或方法） 。 核酸酶：是一类能够水解相邻两个核苷酸残基间的磷酸二酯键， 使核酸分子断 裂的一种酶。 黏性末端：DNA两条链上的断裂位置不在同一碱基对处，而是交错地切开，这 样会形成黏性末端。 同裂酶：来源不同，但识别的是相同的核苷酸靶序列， 切割DNA链后可以形成 相同末端的一类酶则称为同裂酶（也称同功异源酶） 。 质粒：是存在于细胞质巾的一类独立于染色体外的可自主复制的遗传成分， 绝 大多数质粒为共价闭合环状 DNA（cccDNA）少数是线性。 溶菌周期：噬菌体吸附到寄主细胞表面之后，注入 DNA噬菌体的DNAt行复 制及蛋白质的合成，并组装成噬菌体颗粒，最后使寄主细胞裂解，释放出子代噬 菌体颗粒。 COS位点：入噬菌体DNA是一条线性双链 DNA分子，长度为485021）p。在其两 端的5 /末端各带有一个长为12个碱基的单链互补黏性末端。一旦进入宿主细胞， 黏性末端互补配对形成双链环状 DNA这种由黏性末端结合形成的双链区段称为 cos位点 转染：重组体DNA分子直接感染大肠杆菌， 使之侵入寄主细胞内。这种南寄主 细胞捕获噬菌体（病毒）DNA勺过程为转染。 穿梭载体：是指可以在两种截然不同的生物细胞中复制的载体，含有不止一 - 个ori、能携带插人序列在不同种类宿主中繁殖，在原核生物和真核生物细胞中 都能复制和表达。 目的基因：基因丁程主要是通过人丁的方法分离、改造、扩增并表达生物的特 定基因，从而深入开展核酸遗传研究或者获取有价值的基因产物。通常将那些已 被或者准备要被分离、改造、扩增或表达的特定基因或 DNA片段称为目的基因。 基因组文库：某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体储存于某一受体菌 的群体中，这个群体就称为该生物基因组的文库。 CDNA文库：以mRNA为模板，在体外经逆转录酶催化反转录生成 cDNA与适当 载体连接后转化受体菌并繁殖扩增，这样包含着细胞全部 mRNA言息的cDNA克隆 集合称为该组织细胞的cDNA文库。 定点诱变：取代、捅入或缺失克隆基因或 DNA序列中的任何一个特定的碱基， 这种体外特异性改变某个碱基的技术叫作定点诱变。 感受态细胞：受体细胞经过一些特殊方法（如电击法、 CaCL、RhCI等化学试 剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源 DNA分 子进入的感受态细胞。 核糖体结合位点：是指紧靠启动子下游，从转录起始位点开始延伸几十个碱基 长度的一段序列，翻译起始密码子 AUG通常位于它的巾心位置，是核糖体 RNA识 別与结合的位点，在原核生物巾义被称为 SD序列。 密码子偏好