分析化学、教学服务模块 色谱操作条件选择、课件 色谱操作条件选择.pptxVIP

色谱操作条件选择 永州职业技术学院 色谱操作条件选择 分离度(R) 影响分离的因素 分离条件的选择 流动相和固定相 分离度(分辨率，R) 相邻两组分的保留时间之差与两峰基线宽度总和之半的比值 （衡量色谱分离效果） 流动相和固定相 分离度(分辨率，R) 流动相和固定相 影响分离的因素 流动相和固定相 影响分离的因素 1.柱效项及其影响因素 塔板数n反映柱效高低, n越大,柱效越高,色谱峰越窄 增加柱效是提高分离度的一个直接有效手段 提高柱效、改善分离的途径：增加柱长；降低板高 流动相和固定相 影响分离的因素 2.柱选择项及其影响因素 α影响峰峰之间的距离，主要受固定相性质、柱温影响 增大柱选择性是改善分离度的最有力手段 气相色谱中，柱选择性取决于固定相性质和柱温 选择合适的固定相，不同组分产生差别实现分离 一般说，降低柱温可以增大柱的选择性 流动相和固定相 影响分离的因素 3.柱容量项及其影响因素 k影响峰位(tR)，主要受固定相用量、柱温和载气流速的影响 综合考虑分离度、分离时间和峰检测几项因素，控制k的最佳范围 2 ～ 5 GC中，增加固定液用量和降低柱温可以增加 k 流动相和固定相 影响分离的因素 k 影响峰位 n 影响峰宽窄 α影响两峰间距 流动相和固定相 影响分离的因素 如何改进分离度？ α太小，两组分未分开 应改变固定相极性，降低柱温 k 太小，n 也太小， 应增大固定液用量，降低柱温 n 太小，许多组分未分开 应设法降低板高，提高柱效 流动相和固定相 分离条件的选择 色谱条件包括分离条件和操作条件 分离条件是指色谱柱 操作条件是指载气流速、进样条件及检测器 色谱柱的选择 柱温的选择 载气与流速的选择 进样条件的选择 其它条件的选择 气相色谱法概述 分离条件的选择 1.色谱柱的选择（以GLC为例） 固定液的选择： 1)按 “相似相溶”原则：极性相似或官能团相似 2)按组分性质主要差别： 沸点相差大的选非极性固定液 沸点相差小的选极性固定液 3)固定液的凝固点 柱温 固定液最高使用温度(沸点) ——防止固定液流失和失效 气相色谱法概述 分离条件的选择 固定液配比的选择： 高沸点组分→比表面积小的载体 低固定液配比（1% ～ 3%） 低柱温 低沸点组分→高固定液配比（5% ～ 25%） 增大R值，达到良好分离 难分离组分→毛细管柱 气相色谱法概述 分离条件的选择 (2)柱长和柱径的选择 根据R1.5选择L，填充柱一般1～5m,毛细管柱一般20～50m，不可以无限延长柱子 填充柱：内径为3～6mm 毛细管柱：0.2～0.5mm内径 气相色谱法概述 分离条件的选择 2.柱温的选择 柱温太高,会使固定液挥发流失 柱温太低,会使液相传质阻力增大,色谱峰扩张。 原则：保证分离度R的前提下，尽量使用低柱温，但应保证适宜的tR及峰不拖尾。 固定液的凝固点 柱温 固定液最高使用温度(沸点) ——防止固定液流失和失效 气相色谱法概述 分离条件的选择 3.载气与流速的选择 选择流速和载气应同时考虑对柱效和分析时间的影响 流速较小时选N2，Ar（Fc 小，粘度大） 流速较大时选H2，He（ Fc 大，粘度小） N2的的最佳线速度是:7～10cm/s H2的的最佳线速度是:10～12cm/s 选择载气应与检测器匹配 TCD→选H2，He（ Fc 大，粘度小） FID→选N2（ Fc小，粘度大） 气相色谱法概述 分离条件的选择 4.进样条件的选择 ⑴进样量 过大，造成拖尾峰 过小，造成检测不出而不出峰 原则：液体进样量为0.1～5μL,气体进样量为0.1～10mL TCD→进样小于4μL FID →进样小于1μL ⑵进样速度: 快 1s内进样,以免峰形拓宽 气相色谱法概述 分离条件的选择 5.其他条件的选择 气化室温度——一般稍高于试样的沸点(不超过50℃),以保证试样被汽化,避免试样被分解。 检测室温度——一般高于柱温30～500C或等于气化室温度。 THANK YOU