生物化学:第一节 DNA的生物合成.pptVIP

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复制眼的结构? 一条链延伸的方向与复制叉前进的方向一致,它的合成能连续进行,称为先导链; 另一条链延伸的方向与复制叉前进的方向相反,这条新链的合成是不连续的,而且总晚于先导链,所以称为后随链。 3. 复制的过程 二. 原核生物DNA的复制 DNA链的延伸 DNA链的延伸按5→3方向。 5’ 3’ 5’ 3’ 后随链中合成的多个DNA片段,称为冈崎片段。 这种先导链连续合成,后随链断续合成的方式,称为半不连续复制。 3. 复制的过程 二. 原核生物DNA的复制 DNA链的延伸 引物酶在复制原点附近合成一段RNA引物; DNA聚合酶Ⅲ在引物的3末端逐个添加脱氧核苷酸。 随着复制叉的推进,亲代DNA双螺旋不断被解开,先导链也不断延伸。? ① 先导链的合成 3. 复制的过程 二. 原核生物DNA的复制 DNA链的延伸 ② 随后链的合成 引物的合成: 随后链的每个冈崎片段都需要合成RNA引物。也是由引物酶催化。? 3. 复制的过程 二. 原核生物DNA的复制 DNA链的延伸 第一节 DNA的生物合成 引言 中心法则 核酸是贮存和传递遗传信息的生物大分子 生物体的遗传信息以密码的形式编码在DNA分子上,表现为特定的核苷酸排列顺序 遗传信息的流动法则 —— 中心法则 DNA RNA 复 制 转 录 翻 译 Protein 引言 中心法则 中 心 法 则 DNA RNA 复 制 转 录 翻 译 Protein 引言 中心法则 逆转录 RNA复制 中 心 法 则 引言 中心法则 以亲代DNA分子的双链为模板,按照碱基配对的原则,合成出与亲代DNA分子相同的双链DNA的过程 以DNA分子中一条链的部分片段为模板,按照碱基配对原则,合成出一条与模板DNA链互补的RNA分子的过程 复 制 (Replication) 转 录 (Transcription) 翻 译 (Translation) 把mRNA上的遗传信息按照遗传密码转换成蛋白质中特定的氨基酸序列的过程 ( “翻译” 又叫 “转译” ) 真核生物:细胞核 原核生物:细胞质的核质区 一. 复制的基本特征 1. 复制的部位 n1 dATP n2 dGTP n3 dCTP n4 dTTP DNA聚合酶 ( DNA 模板 ) DNA + (n1+n2+n3+n4) PPi 一. 复制的基本特征 2. 复制的反应 半保留复制 DNA复制时,亲代DNA的双螺旋先解旋并分开,然后以每条链为模板,按照碱基配对原则,各形成一条互补链。 每个子代DNA分子中,有一条链来自亲代DNA,另一条则是新形成的。 一. 复制的基本特征 3. 复制的方式 亲代 第一代 第二代 一. 复制的基本特征 3. 复制的方式 (15N标记E.coli DNA) 半保留复制 引物: RNA片段(含10-60 nt) 链的延伸方向: 5′→ 3′ 一. 复制的基本特征 3. 复制的方式 半保留复制 基因组中能独立进行复制的单位叫复制子。 每个复制子都含有控制复制起始的起点。 一. 复制的基本特征 3. 复制的方式 DNA复制的方式有多种。 一. 复制的基本特征 3. 复制的方式 双向(多数) . . 单向(少数) 1. DNA聚合酶 DNA聚合酶反应的特点: 以四种脱氧核苷三磷酸为底物; 反应需要接受模板的指导; 反应要有引物3’-OH的存在; 需Mg2+激活; DNA链的生长方向为5’→3’; 产物与模板的性质相同。 二. 原核生物DNA的复制 1. DNA聚合酶 是一种多功能的酶。 在酶的活性中心上,与这些功能有关的结合部位分布十分精巧。 不能从无到有合成新链,因为在未核实前一个nt是否正确配对,是不会进行聚合反应的。 主要负责RNA引物的切除和校对。 E.Coli DNA聚合酶I 二. 原核生物DNA的复制 1. DNA聚合酶 DNA聚合酶I 3‘→5’核 酸外切酶 5‘→3’核 酸外切酶 5‘→3’核 酸外切酶 聚合酶 C N 5→3核 酸外切酶 3→5核 酸外切酶 蛋白酶 小片段 MW35 000 大片段 MW68 000 Klenow 片 段 二. 原核生物DNA的复制 1. DNA聚合酶 DNA聚合酶I Klenow片段的结构 5 3 3 聚合酶位点 3→5核 酸外切 二. 原核生物DNA的复制 1. DNA聚合酶 DNA聚合酶III DNA聚合酶III是DNA复制酶,聚合活性高。 DNA聚合酶III为异二聚体,使解开的双链可同时复制。 其复杂的亚基结构使其具有更高的忠实性(fidelity)、协同性(cooperativity)和持续性(processivity)。 二. 原核生物DN

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