食品理化检验 旋光度测定 旋光度测定 2.ppt

* 实训二 葡萄糖比旋度测定 【工作目标】 1．进一步熟练掌握旋光仪的使用方法，掌握样品的制备、旋光仪的使用等基本操作方法。 2．学会葡萄糖中比旋度的测定方法和操作技能。 【工作情境】 本任务可在化验室或实验室中进行。 1.仪器和原料 （1）原料：葡萄糖 （2）仪器：旋光仪、分析天平、100ml量瓶、刻度吸管、250ml烧杯、洗瓶、滴管。 葡萄糖比旋度测定 【工作原理】 平面偏振光通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时能引起旋光现象使偏振光的平面向左转或向右转。转过的角度，称为旋光度 偏振光透过1dm并每1ml中含有旋光物质1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。 3.5.3.2 步骤 a 配制葡萄糖溶液：准备称取5g（准至小数点后四位），葡萄糖于150mL烧杯中，加50mL水和0.2mL浓氨水溶液，放置30min后，将溶液转入100mL容量瓶中，以水稀至刻度。然后将容量瓶放入20±0.5℃的恒温水浴中恒温。 b 将仪器电源插入220V交流电源（要求使用交流电子稳压器）并将接地脚可靠接地。 c 向上打开电源开关，这时钠光灯在交流工作状态下起辉经5分钟，钠光灯激活后，钠光灯才发光稳定。 d 向上打开电源开关（若光源开关板上后，钠光灯熄灭，则再将光源开关上下重复扳动1到2次，使钠光灯在直流下电亮，为正常）。 e 打开测量开关，这时数码管应有数字显示。 f 将装有蒸馏水或其它空白溶剂的试管放入样品室，盖上箱盖，待示数稳定后，按清零按扭，试管中若有气泡，应先让气泡浮在凸颈处。通光面两端的雾状水滴，应用软布搽干。试管螺帽不宜旋的过紧，以免产生应力，影响读数，试管安放时，应注意正确的位置和方向。 g 取出试管，并待样品注入试管，按相同的位置和方向放入样品室内，盖好箱盖，仪器数显窗将显示出该样品的旋光率，注意试管应用旋光仪测试样洗湿数次。 h 逐次按下复测按扭，重复读几次，取平均值做该样品的测定结果。 i 如果样品超过测量范围仪器在±40℃处来回振荡，此时取出试管，仪器即自动转回零位，此时可将试液稀释一倍再测。 j 仪器使用完毕后，应依次关闭测量光源电源开关。 k 钠灯在电流供电后系统出现故障不能使用时，仪器也可在钠灯交流供电（光源、开关、不向上升高）的情况下测试，但仪器的性能可能略有降低。 l 当放入样品小于0.5°时，系数可能变化。这时只要按复测按扭，就会出现新的数字。 【操作步骤】 1．标准：比旋度 取本品约10g，精密称定，置100ml量瓶中，加水适量与氨水0.2ml，溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，在20℃时，依法测定，比旋度应为＋52.5°至＋53.0°。 2.样品制备方法：取本品约10g，精密称定，置100ml量瓶中，加水适量与氨试液0.2ml，溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，然后将容量瓶放入20±0.5℃的恒温水浴中恒温，放置30分钟（20℃）。 3.测定操作 3.1打开示数开关，预热15min.这时数码管应有数字显示。 3.2将装有纯化水或其它空白溶剂的试管放入样品室，盖上箱盖，待示数稳定后，按清零按钮，试管中若有气泡应先让气泡浮在凸颈处，通光面两端的雾状水滴应擦干，试管螺帽不宜旋得过紧，以免产生应力，影响读数。试管安放时应注意标记的位置和方向。 3.3按复测按钮3次，示数应为零，若不为零，示差不得过±0.005。 3.4取出试管，倒出空白溶液，注入供试液少量，冲洗数次后装满溶液，按相同的位置和方向放入样品室内盖好箱盖，仪器将显示该样品的旋光度。 3.5按复测按钮数次，取平均值作为测定结果。 3.6如样品超过测量范围，仪器在±45°处来回振荡，此时，拿出试管，仪器会自动复位。 3.7测试结束后，应先将示数开关关闭，再依次关灯源开关，电源开关，取出测试管冼净，晾干，样品室可放硅胶吸湿。 3.8 登记使用时间和仪器使用状况。 【结果计算】 *