鉴定提取分离试验.pptVIP

第二类：物质的分离、（粗）提取及鉴 定实验 (3 个） ? 检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质 (1- p18) ? 叶绿体色素的提取和分离 (1-p97) ? DNA 的粗提取与鉴定（选 1-p54) 考点 2 验证（鉴定）类实验 1 ．实验归类 实验名称 鉴定对象 试剂 颜色 生物材料 备注 淀粉的 鉴定 淀粉 碘液 蓝色 脱色 的 叶片 无 还原糖 的鉴定 还原糖 斐林 试剂 砖红色 沉淀 苹果或梨 的匀浆等 甲乙液 现 混现用 、 水浴加热 脂肪的 鉴定 脂肪 苏丹Ⅲ ( 或Ⅳ) 染色 橘黄 ( 或 红 ) 色 花生种 子切片 需用 高倍 镜 观察 二轮步 p69 第 2 点 实验名称 鉴定对象 试剂 颜色 生物材料 备注 蛋白质 的鉴定 蛋白质 双缩脲 试剂 紫色 豆浆、稀蛋 清等 先加 A 液， 后加 B 液， 摇匀 尿糖的 检测 葡萄糖 葡萄糖 试纸 有色 水、葡萄糖溶 液、三份模拟 “尿样” 无 叶绿体 中色素 的提取 和分离 四种色素 提取液： 无水乙 醇；分 离液： 层析液 胡萝卜素： 橙黄色； 叶黄素： 黄色；叶 绿素 a ： 蓝绿色； 叶绿素 b ： 黄绿色 新鲜的绿叶 ( 如 菠菜叶 ) 加入 二氧 化硅 是为 了研磨得 更充分； 碳酸钙 可 防止研磨 中色素被 破坏 2. 生物学中常用的试剂和药品 试剂 鉴定 ( 染色 ) 的物 质 ( 结构 ) 是否加热 颜色 注意事项 斐林试剂 还原糖 是 砖红色 现用现配 双缩脲试剂 蛋白质 否 紫色 A 液与 B 液不能混 合，需先滴加 A 液， 再滴加 B 液 苏丹Ⅲ染液 脂肪 否 橘黄色 苏丹Ⅳ染液 脂肪 否 红色 甲基绿 DNA 否 绿色 DNA 、 RNA 同时 存在时要混合使 用且现用现配 吡罗红 RNA 否 红色 健那绿 线粒体 否 蓝绿色 龙胆紫溶液 ( 醋酸洋红 ) 染色质 ( 体 ) 否 深紫色 ( 红色 ) 染色前必须漂洗 彻底 实验原理 鉴定成分 还原糖 脂肪 蛋白质 实验材料 苹果、梨 花生种子 豆浆或蛋清 实验药品 斐林试剂 苏丹Ⅲ染液 双缩脲试剂 0.1g/mLNaOH, 0.05g/ mLCuSO 4 苏丹Ⅳ染液 0.1g/mLNaOH, 0.01 g/mLCuSO 4 实验现象 砖红色（ Cu 2 O ） 橘黄色 紫色 实验步骤 制备样液 ↓ 斐林试剂 ↓ 水浴加热 ↓ 观察 （淡蓝色→ 棕色→砖红色） 徒手切片 ↓ 苏丹Ⅲ染色 ↓ 50% 酒精去 浮色 ↓ 制作装片 ↓ 显微镜观察 制备样液 ↓ 双缩尿 A 试剂 ↓ 双缩尿 B 试剂 ↓ 振荡 ↓ 观察 ( 八 ) 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 （ 1-p18) 某些化学试剂能使生物组织中的有机物产生特定的颜色反应 2 ．斐林试剂和双缩脲试剂的比较 突破考点·提炼技法 比较项目 斐林试剂 双缩脲试剂 使用方法 甲液和乙液混合均 匀后即可使用，且 现配现用 使用时先加 再加 实质 新配制的 Cu(OH) 2 反应 碱性条件下的 Cu 2 ＋ 不 同 点 呈色反 应条件 需 不需 即可 反应 A 液 B 液 水浴加热 加热 一轮步 p7 突破考点·提炼技法 反应 原理 还原糖中的醛基 被 Cu(OH) 2 氧 化， Cu(OH) 2 被 还原为 Cu 2 O 具有两个以上 肽键的化合物 在碱性条件下 与 Cu 2 ＋ 反应生 成络合物 颜色 砖红色 紫色 不 同 点 浓度 乙液 CuSO 4 浓度 为 B 液 CuSO 4 浓 度为 相 同 点 都含有 NaOH 、 CuSO 4 两