早期结直肠癌基因诊断的研究进展.docxVIP

期结直肠癌基因诊断的研究进展 【关键词】 直肠癌 基因诊断 结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一 ，我 国1990?1992年27个省，自治区，直辖市恶 性肿瘤死亡抽样调查（约占同期人口 10%）结 果发现,结直肠癌发病率以4%勺年增长率迅 速升高，目前占消化道肿瘤的第二位［1］。所 谓早期结直肠癌一般指 Dukes A期癌，系指 癌肿浸润深度达黏膜下层和固有肌层。 由于 结直肠黏膜内无淋巴管存在，所以早期结直 肠癌一般不会发生淋巴结转移，可以治愈， 若能发现Duckes A期则可以提高生存率。 待患者出现症状时才来就诊，已非早期，故 结直肠癌的早期诊断就显得尤为重要。 许多研究表明，结直肠癌变是一个涉及原 癌基因激活、抑癌基因失活等多基因、多阶 段、多步骤渐进演化的积累过程。与结直肠 癌相关的抑癌基因有 p53、APC DCC^,原 癌基因有K ras、c myc等。因此测定与 结直肠癌发生密切相关的基因有助于早期 结直肠癌的诊断。 CD44 人的CD44基因位于第11号染色体短臂上， 大小约60kb,含有20个外显子。其中外显子 6?15（即V1?V10）在转录过程中易于通过 选择性剪接形成剪接变异体，即CD44V Coppola D等对34例结直肠癌切除标本的检 测结果发现：腺瘤中CD44V6佥出率为100%, 癌为91%,转移灶最弱，仅38%，因此认为 D44V6的表达是结直肠癌的早期标志。国内 吴健雄等的研究证实：CD44V mRNA在结直 肠癌中的异常表达具有普遍性，既可能是早 期癌变伴随出现的生物学标志，也可能是判 断结直肠癌转移的有用指标。Kim等认为， 在结肠癌进展过程中,CD44基因的表达与突 变的K ras基因相关联，是被活化的H ras 基因所诱导，并认为此种异常表达早于 K ras和p53基因突变。因而认为，CD44V6 基因异常表达是肿瘤发生的早期事件。 Yamac^应用RT PCR及Southern杂交技术 检测了 25例结直肠癌患者及15例健康对照 者粪便中脱落细胞的 CD44 CD44V6及 CD44V10的表达。结果显示结直肠癌患者的 CD44V6及CD44V10的阳性检出率分别为 68% 和60%,术后的阴转率分别为％和％。 而且 CD44V阪 CD44V10均可在Duckes A期患者 术前粪便中检出。因而，对粪便中脱落细胞 的CD44基因异常表达分析可作为非侵袭性 方法用于结直肠癌患者的早期诊断及无症 状高危人群的筛选。 p53 p53基因位于人类17号染色体短臂()。全 长约1620kb。由11个外显子和10个内含子 组成。p53基因在进化过程中高度保守，外显 子2、4、5、7、8分别编码5个在进化上高 度保守的结构。野生型p53(WT p53)与调控 细胞生长周期、调节细胞转化、 DNAM制、 诱导细胞程序性死亡有关。有实验表明，分 化良好的腺瘤，包括家族性多发性结肠息肉 这一常染色体显性遗传病以及结直肠息肉 中p53的表达明显低于结直肠癌。 结直肠癌 p53基因的缺失率为 50%?70% [7?9]1996 年，Eguchis等采用PCR SSCP技术对11例 结直肠癌患者的粪便进行检查， 7例中查到 p53基因突变(64 % )。综上，p53基因的缺 失或突变与结直肠癌的发生密切相关。 DCC 结直肠癌缺失基因(Deleted in Colorectal Carcinoma ,DCC) 作为 90 年代 发现的肿瘤抑制基因，其与结直肠癌的相关 性研究正在不断深入。Vogelstein[10] 等报 道，在结直肠黏膜上皮由正常转化为上皮增 生和腺瘤，并演进到癌变的过程中，有47%勺 进展期腺瘤(腺体或细胞呈中、重度不典型 增生)和73%勺结直肠癌细胞中可检出染色 体18q有LOH,但在早中期腺瘤(cm)很少见。 而在90%勺有18qLOH的病人中，缺失区包含 了 DCC基因位点[11,12]。Goi[13]等用 Western blotting 法检测结肠癌、癌旁组织 及腺瘤中的DCC^白表达情况，则发现癌组 织中DCCS白明显减少或缺失，在腺瘤组织 中DCC^白有明显表达，与正常组织几乎相 同，提不 DCCI因缺失或失活是结肠腺瘤向 癌转变的一个促发因素。 DCC^因是目前发 现的最长的人肿瘤抑制基因，尤其在结直肠 癌的发生发展中具有重要意义，其失活和表 达异常与结直肠癌的诊断关系密切。但 DCC 基因的失活机制、DCC^白的功能及其诱导 细胞分化的机制还有待于进一步探索。 Ras Ras基因家族分为K ras、H ras、N ras, 基因编码蛋白质的相对分子质量均为 21 Ku, 故称为p21。Ras基因的突变在结直肠细胞 癌变过程中起启动作用并是一个早期事件 ， 突变产生具