氨氮的测定(分光光度法).docxVIP

氨氮的测定（纳氏试剂光度法） 原理：碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合 物，此颜色在较宽的波长范围内具有强烈吸收。通常测量用波长在 410-425nm范围。本法最低检出浓度为 L。 仪器：紫外分光光度计、PH计、100ml具塞量筒。 试剂（配制试剂及水样稀释均用无氨水） 10% （m/v）硫酸锌溶液：称取10g硫酸锌溶于水稀释至100ml。 25%氢氧化钠溶液：称取25g氢氧化钠溶于水，稀释至100ml，贮于 聚乙烯瓶中。 硫酸：P = 纳氏试剂： 称取 16g 氢氧化钠，溶于 50ml 水中，充分冷却至室温。另取 7g 碘化 钾和 10g 碘化汞溶于水， 然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶 液中，用水稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。 酒石酸钾钠溶液： 称取50g酒石酸钾钠溶于100ml水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定 容至 100ml。 铵标准溶液：称取3.819g经100C干燥过的氯化铵溶于水中，移入 1000ml容量瓶中，稀释至标线，此溶液浓度为 1000mg/L。 无氨水制备： 每升蒸馏水中加硫酸，在全玻璃馏器中重蒸馏，弃去 50ml 初馏液， 接取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存。 步骤： 预处理： 取100ml水样于具塞量筒中，加入1口110漏酸锌溶液和一％氢氧化钠 溶液，调节PH至左右，混匀。放置使沉淀，用经无氨水充分洗涤过 的中速滤纸过滤，并去初滤液 20ml。 校准曲线的绘制： 移取 1ml 铵标准液于 100ml 容量瓶中 , 用水稀释至标线 , 此溶液为 10mg/L分别吸取、、、、铵标准液于100ml容量瓶中加水稀释至标线， 其含量分别为L、L、L、L、L,然后分别取以上铵标准液 50ml水样 于比色管中，加酒石酸钾钠溶液，混匀，加纳氏试剂，混匀，放置 10分钟在波长420nm处，用光程10mnik色皿，经水为参比，测量出 吸光度，测完试样后， 紫外分光光度计会自动根据吸光度与氨氮的含 量关系绘制曲线图， 并保存在紫外分光光度计内 （分光光度计的使用 见）。 水样的测定： 取 1ml 经絮凝沉淀预处理后的水样，加入比色管中，并加水稀释至 50ml，然后加酒石酸钾钠溶液，混匀，加纳氏试剂，混匀，放置 10 分钟后，同校准曲线步骤测量， 此时紫外分光光度计会根据校准曲线 显示该水样的氨氮含量，根据该含量乘以 50，即得出被测水样的总 含量。 注意事项： 纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例，对显色反应的灵敏度有较大影 响。静置后生成的沉淀应除去。 滤纸中常含痕量铵盐， 使用时注意用无氨水洗涤。 所用玻璃皿应避 免实验室空气中氨的沾污。