分子生物技术问答题-农大期末考试复习题.docVIP

试比较 DNA复制与转录的异同点。 相同点：都以 DNA链作为模板，合成的方向均为 5’→ 3’，聚合反应均遵从碱基配对原则，核苷酸之间形成磷酸二酯键使核苷酸链延伸。不同点： 复制 转录 模板 两股链均复制，全部信息 模板链，部分信息 原料 dNTP NTP 酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶 产物 子代双链 DNA（半保留复制） mRNA， tRNA， rRNA 引物 RNA引物 无 配对 G-C; T-A A-U; T-A; C-G 简述真核与原核基因转录方面存在的差异。 原核生物 真核生物 RNA聚合酶 只有 1 种。 3 种，分别转录不同的 RNA mRNA结构 通常 5‘帽子和 3’尾巴 顺反子 功能相近的基因通常形成一个操纵子， 由共同的 调控区进行转录调控。 转录起始 不同的聚合酶有不同的启动子调 控 转录终止 在 RNA水平发生作用： 不依赖ρ因子的终止子在 3 类 RNA聚合酶的转录因子都需要 柄部富含 GC碱基对，而且连接一串富含 U 的茎 富含 AT的序列。 环结构；依赖于ρ因子的终止子通过ρ因子与β 亚基的作用促使转录终止。 简述 RNA的种类及其生物学作用。 比较真核生物和原核生物 mRNA的异同。 原核生物和真核生物 mRNA的差别在于可翻译顺反子的数目，真核生物的 mRNA是单顺反子。而且真核生物的 mRNA在其 3’末端有多聚腺苷酸尾巴（ polyA ），而 5’末端有 7－甲基鸟嘌呤帽子。真核生物的 mRNA尾部区域有 时会携带特定的去稳定因子。 简述真核生物 mRNA基因的转录过程。 模板识别： RNA聚合酶与双链 DNA的启动子开始结合； DNA双链被分开；形成转录泡。 转录的起始： RNA中第一个核苷酸键合成；合成前 9 个核苷酸键时，酶仍旧位于启动子上；聚合酶成功地完成了 RNA链的延伸并离开启动子。 3) 延伸阶段： 延伸阶段包括 DNA 结构的改变带来的转录泡前移。 在转录泡中， 模板链的瞬间解旋区与新生的 RNA 链在延伸点发生配对。 RNA 聚合酶沿 DNA移动， RNA链逐渐延长，酶一边移动一边将 DNA解螺旋，使一段新的模 板以单链形式暴露出来。核苷酸以共价键形式被添加到 RNA链的 3’末端，在解旋区形成一个 RNA-DNA杂交链。 解旋区之后的 DNA 模板链又与另一条单链 DNA 配对并形成双螺旋。 RNA 形成游离的单链。 4) 转录的终止：包括对那些不再被加到 RNA上的碱基位点进行识别。磷酸二酯键停止形成，转录复合体分离， 转录终止。当最后一个碱基加入到 RNA 链上，转录泡崩解， RNA-DNA杂交被破坏， DNA重新形成双螺旋，聚合酶和 RNA都释放下来。 简要说明真核生物 mRNA的结构特点。 真核生物转录的前体 RNA如何加工为成熟的 mRNA 1) 5’端加帽子。 5’加帽是一个多步加工过程，第一步是鸟苷转移酶将一个鸟苷酸加在 5’ -5 ’对接的磷酸二酯键。第二步由鸟嘌呤甲基转移酶将一个甲基基团加到嘌呤环的 5’ RNA的前端，产生 7 位氮原子使 5’帽子鸟嘌 呤转变为 7- 甲基鸟嘌呤。 2) 3  ’端加  poly(A)  尾巴。在切除前体  mRNA 3末端的一段序列后，在  poly (A)  多聚酶作用下，合成再加上 多聚腺苷酸，约 250 个腺嘌呤核苷酸尾巴。 内含子的剪接。核 mRNA前体含有边界顺序、分枝点序列及其内含子5’端保守序列，本身不能形成二级结 构，必需依赖于 snRNP(U1,U2,U4,U5 和 U6)的帮助才能形成剪接体，进行自我剪接，将内含子（ intron ）去除，而 把外显子（ exon）连接起来。 4) 化学修饰。某些碱基进行甲基化等修饰 8. 真核生物细胞的 RNA 内含子剪接的主要方式。 9. 简述转录因子的结构特点及其作用。 转录因子也称转录激活因子， 它们可对转录起始复合物的组装及转录速率施加影响， 决定某一基因是否表达，通常有一个标准结构，存在 DNA结合域和转录激活结构域。 DNA识别或结合域能和特定的基因的启动子区结合，但不能激活基因的转录；转录激活结构域可以在适当的空间激活转录。 概括典型原核生物启动子的结构和功能。 启动子是与 RNA聚合酶结合和转录起始的特殊序列。典型的原核生物启动子大约 40 个核甘酸并有 2 个重要的 序列。 － 35 区：位于复制起始位点上游 35 个核甘酸的 6 个核甘酸序列，能被 RNA聚合酶全酶识别并结合。其中， ? 亚基在识别中起重要作用。因为没有 ?亚基的核心酶只能随机地结合在 DNA上。 － 10 区：位于－ 10 处的 6 核甘酸序列。 RNA聚合酶松散结合到－ 35 区后，