202010第十章DNA的生物合成.pptVIP

三、滚环复制 ? 一些简单的环状 DNA 如质粒、病毒 DNA 或 F 因子经接合作用转移 DNA 时，采用滚环复制 (rolling cycle replication ) ? 滚环复制时，亲代双链 DNA 的一条链在复制 起点处被切开， 5 端游离出来。 DNA pol Ⅲ 可以将脱氧核苷酸聚合在 3-OH 端。 ? 外环的 5 - 端不断向外侧伸展，作为模板指导 另一条链的合成延伸 3 ? -OH 5 ? -P 5 ?? 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 3 5 ? 5 ? 5 ? ? 3 ? 3 ? 3 ? 5 DNA 的滚环复制 3 3 5 5 5 复制叉的解链方向 3 5 3 3 5 5 5 复制叉的解链方向 3 5 领头链 随从链 冈崎片段 四、复制的保真性 ? 新链的延伸过程严格遵守碱基配对的规律，即 A ＝ T ， G ≡ C 。 ? DNA 聚合酶对碱基的选择能力，能选择与亲代模 板链正确配对的碱基进入子链相应的位置。 ? 校读修正错配碱基，通过 DNA 聚合酶的 3′→5′ 外 切酶活性，在碱基发生错配时，及时切除并更换 上正确碱基。 第二节 DNA 复制的反应体系 Reaction System for DNA Replication ? DNA 复制的反应体系组成有： ①模板 (template) ， DNA 的两条单链均作为模板 ②主要的复制酶， DNA dependent DNA polymerase or DDDP , DNA pol ④引物 (primer) ，是一段短的特殊 RNA ③底物 (substrate) ， dNTP ⑤其他的酶和蛋白质因子，包括拓朴异构酶、解螺旋 酶、 DNA 单链结合蛋白、引物酶、 DNA 连接酶等 一、 DNA 聚合酶 ? DNA dependent DNA polymerase ， DDDP ，或 DNA pol 功能： 5→3 聚合活性 外切活性 5→3 外切活性 3→5 外切活性 Go to 26 3 5 5 3 5→3 外切活性 3 5 5 3 3 5 5 3 3→5 外切活性 3 5 5 3 3 5 5 3 3 5 5 3 ( 一 ) 原核生物 DNA 聚合酶 ? E coli 中的 DNA 聚合酶，已知有三种，分别为 DNA pol I ， DNA pol II ， DNA pol III 5→3 聚合活性 外切活性 5→3 外切活性 3→5 外切活性 切除引物 校读作用 DNA pol Ⅰ DNA pol Ⅱ DNA pol Ⅲ 分子组成 单一多肽链 不清 10 种亚基的不对称二 聚体 生物学活性 （ 1 ） 5 ′→ 3 ′聚合 活性 聚合活性低 有 聚合活性高 （ 2 ） 3 ′→ 5 ′外切 酶活性 有 有 有 （ 3 ） 5 ′→ 3 ′外切 酶活性 有 无 无 功能 ①校读作用 无其他酶时发挥 作用 ①主要的复制酶 ②修复填补 ②校读作用 E ． coli 中三种 DNA 聚合酶的比较 DNA pol Ⅲ的不对称异源二聚体结构 γ 复合物 核心酶 α α ε ε θ θ β 2 β 2 τ 2 ( δ δ χ ψ )2 γ 2 核心酶 DNA 聚合酶Ⅰ的校读作用 3 ′ 5 ′ 3 ′ 5 ′ DNA pol I 的 3 ′→ 5 ′外切活性 错配碱基 A G A G C T T A AA G C G T G C G G T A T G T C T C G A A T TA C G C A C G C C A C DNA 聚合酶种类 生物学功能 DNA 聚合酶 α 有引物酶活性，参与复制的引发过程 DNA 聚合酶 β 主要参与 DNA 的修复过程 DNA 聚合酶 γ 参与线粒体中 DNA 的复制 DNA 聚合酶 δ 是最主要的复制酶，参与链的延伸 DNA 聚合酶 ε