2020蛋白质核酸沉淀分离技术.pptVIP

方法二 各级均离心分离沉淀物，将沉淀溶于 2 倍体积的缓冲液中，测 定其中 总蛋白 和 目标蛋白 浓度 以饱和度为横坐标，总蛋白和目标蛋白浓度为纵坐标，得到蛋 白质溶解度曲线 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 总蛋白 目标蛋白 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 总蛋白 目标蛋白 蛋 白 质 量 ( m g ) 或 酶 活 力 硫酸铵饱和度％ 蛋 白 质 量 ( m g ) 或 酶 活 力 硫酸铵饱和度％ 5 、盐析的影响因素 （ 1 ） 离 子 强 度 与 离 子 类 型 S ：离子强度为 I 时蛋白质的溶解度； S 0 ：离子强度为 0 时蛋白质的溶解度； K S ：盐析常数。 盐析时，蛋白质溶解度与中性盐的离子强度的关系： 当溶剂的温度一定时，对 于某一溶质， S 0 是一常数 β （溶解度常数） K S 越大，有效成分溶解度随盐浓度增加而减小的程度越大。 K S 越大，分级范围越小，盐析效果越好。 多价阴离子具有很高的 K S ，但高价阳离子的存在反而降低 K S ； 大而不规则的蛋白分子 K S 越大。 K S 主要取决于盐的性质： 离子价数 离子半径 介电常数 K S