蛋白质含量的测定测定蛋白质含量的方法`.pptVIP

蛋白质含量的测定 ? 掌握蛋白质含量测定的原理和方法 ? 学会标准曲线的绘制 ? 熟练使用分光光度计 实验目的 测定蛋白质含量的方法 ? 测定蛋白质含量的方法较多 ? 基本上都是根据蛋白质的理化性质和生 物学活性建立起来的。 实 验 原 理 二、比色法： 利用蛋白质与不同试剂的呈色反应， 测定蛋白质的含量，如双缩尿法和 酚试剂法 （ lowry s method ）。 三、紫外分光光度法： 利用蛋白质对 280nm 紫外 光有最大的吸光度而采用 一、凯氏定氮法： 根据蛋白质的含氮量来 测定蛋白质的含量 公式 : 每 g 样品中含氮克数 × 6.25 × 100 蛋白质 呈色试剂 : 酚试剂 磷钼酸 -- 钨酸的混和酸 半胱氨酸、 酪氨酸、 色氨酸 组氨酸 还原型混和酸 ( 兰色 ) 蛋白质肽键 碱性 烯醇化 铜离子 在 pH10 条件下螯合在肽键结构中 从而使电子转移到混和酸的显色剂上， 增强了 酚试剂 对蛋白质的敏感性。 ? 蛋白质与酚试剂呈色 深浅 与蛋白质的 含量 成正比 ，利用蛋白质的浓度与呈 色的关系，制备标准曲线，来测定样 品中的蛋白质含量。 ? 用已知浓度的标准牛血清白蛋白溶液 （浓度为 50mg%