蛋白质的性质实验一蛋白质及氨基酸的呈色反应.pptVIP

蛋白质的性质实验（一） —— 蛋白质及氨基酸的呈色反应 一、实验目的 ? 了解蛋白质的基本结构单位及主要连接方式 ? 了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理 ? 学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法 二、实验原理 ? 双缩脲反应 ? 两分子尿素加热到 180 ℃左右时，生成双缩脲并放出一分子氮，双缩脲 在碱性环境中能与 Cu 2+ 结合生成 紫红色化合物 ，此反应称为双缩脲反应 ? 蛋白质分子中有肽键，其结构与双缩脲相似，也能发生此反应，因此 该反应可用于蛋白质的定性或定量测定 ? 茚三酮反应 ? 所有的 α - 氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成 蓝紫色物质 ，除 了脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生 黄色物质 ? 该反应十分灵敏，是一种常用的氨基酸定量测定方法 ? 该反应分为两步：第一步是氨基酸被氧化形成 CO 2 、 NH 3 和醛，水合茚 三酮被还原成还原型茚三酮；第二步是所形成的还原型茚三酮结合另一 分子水合茚三酮和氨缩合生成有色物质 R CHC NH 2 O OH + O O OH OH O O N OH O 水合茚三酮 蓝紫色 ? 黄色反应（ Pauly 反应） ? 含有苯环结构的氨基酸，如酪氨酸和色氨酸，遇硝酸后， 可被硝化成黄色物质，该化合物在碱性溶液中进一步形成深 橙色的硝醌酸钠