微生物技术 微生物的分离纯化、微生物的鉴定 微生物的分离与鉴定.pptx

;1;Part;单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，称为菌落(colony)。;一个菌落是一个纯种，也是一个纯培养； 单个微生物只在固体培养基上形成菌落； 在液体培养基中不会形成菌落;同一细菌在不同的培养平板上形成不同的特征菌落 ;;Part;微生物纯种分离;微生物样品;;一、平板划线法; 划线的形式有多种，可将一个平板分成四个不同面积的小区进行划线,第一区(A区)面积最小，作为待分离菌的菌源区，第二和第三区(B、C区)是逐级稀释的过渡区，第四区(D区)，则是关键区，使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用。为了得到较多的典型单菌落,平板上四区面积的分配应是D＞C＞B＞A。;;;;;;分区划线法（蛇形线法）操作图;分区划线法适用范围： 适用于浓度较大的样品;（二）连续划线法; 二、稀释平板法 稀释平板法包括涂布平板法和倾注平板法。 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别进行涂布平板或稀释平板操作，再进行培养。 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。 ;;稀释分离倾注平板;涂布平板法;土壤中微生物的分离——平板涂布法 (一) 土壤取样 从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。 取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。 (二) 制备培养基 制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。;◆应在火焰旁称取土壤10g。 ◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行;（四）取样涂布;注意事项 ①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。 ②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。 ③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。 ④涂布平板法所选择的稀释度很重要，一般以三个稀释度中的第二个稀释度所出现的平均菌落数在50个左右为最好。; 三、单细胞（孢子）分离 采取显微分离法从混杂群体中???接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养，称为单细胞(单孢子)分离法。 ; 单细胞他离法的难度与细胞或个体的大小成反比，较大的微生物如藻类、原生动物较容易，个体较小的细菌则较难。在显微镜下使用单孢子分离器进行机械操作，挑取单孢子或单细胞进行培养。也可以采用特制的毛细管在载玻片的琼脂涂层上选取单孢子并切割下来，然后移到合适的培养基进行培养。单细胞分离法对操作技术有比较高的要求，多限于高度专业化的科学研究中采用。;Part;第二章 微生物的鉴定; 培养特性：指微生物在培养基上所表现的群体形态和生长情况。 形态结构：通过染色，在显微镜下微生物的形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性。 ;1、细菌的培养特性 固体培养基 菌落大小、形态、颜色、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性 液体培养基 表面生长情况（菌膜、环）、混浊度及沉淀 半固体培养基 穿刺接种观察运动、扩散情况;;细菌的培养特征 ;金葡在不同平板上的菌落特征;沙门氏菌在不同平板上的菌落特征; 固体斜面培养 液体培养基 ;2、酵母的培养特性 固体培养基 菌落大小、形态、颜色、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征 液体培养基 表面生长情况（菌膜、环）、混浊度及沉淀;酵母的菌落特征;3、霉菌的培养特性 固体培养基 菌落大小、颜色（正反面）、菌落表面形状、 菌落组织形状 液体培养基 表面生长情况（菌膜、环）、混浊度及沉淀;棉絮状毛霉菌落特征;地毯状青霉菌落特征;绒毛状曲霉菌落特征;4、放线菌的培养特性 固体培养基 菌落大小、颜色（正反面）、光泽度、质地、菌落表面形状、菌落组织形状 液体培养基 静置培养：表面生长情况（菌膜、环）、沉淀 振荡培养：球状菌丝团 ;产抗菌素的放线菌的菌落特征　　 A：卡特利链霉菌；B：弗氏链霉菌；C：吸水链霉菌金泪亚种；D：卡那霉素链霉菌；E：除虫链霉菌；F：生磺酸链霉菌;1、细菌的形态结构 细菌的基本形态 细菌大小 细菌细胞结构（染色观察）;;; ;弧菌;特殊形态;异 常 形 态;细菌大小;细菌的大小 ;细菌细胞结构;芽孢染色法;鞭毛染色法;荚膜染色法;2、酵母的形态结构 酵母的基本形态 酵母大小 酵母细胞结构（染色观察）;3、放线菌的形态结构 放线菌的基本结构 链霉